1、第一部分、嚴(yán)重?zé)齻笫竽c道調(diào)節(jié)性T細(xì)胞(Treg)對(duì)T淋巴細(xì)胞免疫功能的影響
　　目的：體外分選嚴(yán)重?zé)齻蟠笫竽c道淋巴結(jié)中CD3+T細(xì)胞及Treg細(xì)胞，予以不同濃度Treg與CD3+T細(xì)胞體外共培養(yǎng)，以此來探討Treg濃度的升高對(duì)腸道T細(xì)胞免疫功能的影響。
　　方法：將10只SD大鼠用控時(shí)控溫控壓蒸汽燙傷儀在每只大鼠背部造成全身體表面積為30％的III度燒傷，于傷后12小時(shí)頸椎脫臼處死大鼠，提取腸道淋巴細(xì)胞，抗原特異性玻璃柱

2、法純化CD3+T細(xì)胞，采用免疫磁珠分選技術(shù)分選CD4+CD25+Treg細(xì)胞，將純化后的CD3+T細(xì)胞隨機(jī)分成空白對(duì)照組和A、B、C、D共4個(gè)濃度組。各組CD3+T細(xì)胞均為106個(gè)，其中空白對(duì)照組不加Treg，各個(gè)濃度組分別加入1×104、2×104、5×104、1×105個(gè)分選好的Treg細(xì)胞，體外共培養(yǎng)12小時(shí)后，采用流式細(xì)胞技術(shù)檢測(cè)CD4+/CD8+T細(xì)胞、Th1/Th2細(xì)胞比例及T細(xì)胞凋亡率；采用ELISA方法檢測(cè)IL-2和IL

3、-10在培養(yǎng)液上清中的表達(dá)變化。
　　結(jié)果：
　?。?）嚴(yán)重?zé)齻蟛煌瑵舛鹊腡reg作用于 T細(xì)胞后，隨著濃度升高，各組CD4+、CD8+T細(xì)胞數(shù)目逐步下降，CD4+/CD8+T細(xì)胞比例也隨之下降，與空白對(duì)照組(1.22±0.12)比較，A組(0.95±0.08)比例出現(xiàn)下降，D組(0.35±0.09)比例明顯下降，各組差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05）。
　?。?）嚴(yán)重?zé)齻蟛煌瑵舛鹊腡reg細(xì)胞作用于T細(xì)胞后，與空

4、白對(duì)照組比較，各組Th1/Th2細(xì)胞比例逐漸下降，隨著濃度的升高，Th1細(xì)胞比例降低，Th2細(xì)胞比例明顯升高，差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05）。
　?。?）嚴(yán)重?zé)齻蟛煌瑵舛鹊腡reg作用于T細(xì)胞后，隨濃度升高，各組 T細(xì)胞總調(diào)亡率逐步升高，與空白對(duì)照組(32.04±1.84)比較，A組(35.25±2.04) T細(xì)胞總調(diào)亡率升高，D組（51.69±1.47）T細(xì)胞總調(diào)亡率明顯升高，差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05）
　　

5、（4）與空白對(duì)照組比較，隨濃度升高，各組培養(yǎng)上清液的IL-2表達(dá)下降，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)；而IL-10表達(dá)升高，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。
　　結(jié)論：大鼠嚴(yán)重?zé)齻竽c道Treg細(xì)胞的升高，可能參與了腸道的T細(xì)胞免疫紊亂的過程。隨著Treg濃度的升高，CD4+/CD8+T細(xì)胞比例也隨之下降，促進(jìn)Th1向Th2飄移，T細(xì)胞凋亡率升高，IL-2表達(dá)下降、IL-10表達(dá)升高，產(chǎn)生免疫抑制狀態(tài)，適度減少Treg的數(shù)目或

6、抑制其活性，可能作為糾正燒傷后免疫功能抑制狀態(tài)的一個(gè)新的靶點(diǎn)。
　　第二部分、嚴(yán)重?zé)齻笫竽c道Th17/Treg表達(dá)變化及其對(duì)腸黏膜屏障損傷的影響
　　目的：觀察嚴(yán)重?zé)齻蟠笫竽c道淋巴結(jié)輔助性T17細(xì)胞（Th17）及調(diào)節(jié)性T細(xì)胞（Treg）比例變化情況，門靜脈血及腸黏膜組織中IL-17A、IL-6水平變化及腸黏膜損傷程度，初步探討Th17/Treg及Th17相關(guān)細(xì)胞因子變化對(duì)腸黏膜屏障損傷的影響。
　　方法：把50只健

7、康雄性SD大鼠，隨機(jī)分成正常對(duì)照組和燒傷后12小時(shí)、24小時(shí)、36小時(shí)、48小時(shí)（T1-T4），每組各10只，用控時(shí)控溫控壓蒸汽燙傷儀在每只燙傷組大鼠背部造成全身體表面積為30%的III度燒傷，于各時(shí)相點(diǎn)頸椎脫臼處死SD大鼠，提取腸道淋巴細(xì)胞，運(yùn)用流式細(xì)胞儀檢測(cè)Th17及Treg細(xì)胞的比例變化，提取腸黏膜組織上清液采用ELISA方法檢測(cè)IL-17A、IL-6的表達(dá)變化，取門靜脈血清采用ELISA方法檢測(cè)IL-17A、IL-6含量的表達(dá)變

8、化，同時(shí)取距回盲部7cm的一段小腸組織進(jìn)行切片、HE染色，顯微鏡下觀察損傷程度，運(yùn)用改良chiu評(píng)分法進(jìn)行評(píng)分。
　　結(jié)果：
　　（1）嚴(yán)重?zé)齻蟾鱾€(gè)時(shí)相點(diǎn)，Th17細(xì)胞比例逐漸升高，與正常對(duì)照組(0.82±0.07)比較，T1組Th17比例(1.54±0.07)出現(xiàn)升高，T4組Th17比例(3.03±0.08)顯著升高，差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.01）。
　　（2）嚴(yán)重?zé)齻蟾鱾€(gè)時(shí)相點(diǎn)，Treg細(xì)胞比例逐漸升高，與

9、正常對(duì)照組(8.07±0.82)比較，T1組Treg比例(17.42±1.17)出現(xiàn)升高，T4組Treg比例(40.66±0.93)顯著升高，差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.01）。
　?。?）嚴(yán)重?zé)齻蟾鱾€(gè)時(shí)相點(diǎn)門靜脈血中IL-6、IL-17A均升高，與正常對(duì)照組IL-6(36.3±2.83)、IL-17A(16.3±1.25)比較，T1組IL-6(105.7±5.89)、IL-17A(31.3±4.77)含量均升高，48小時(shí)T4組

10、IL-6(263.9±5.30)、IL-17A(107±3.43)含量均顯著升高，差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.01）。
　?。?）嚴(yán)重?zé)齻蟾鱾€(gè)時(shí)相點(diǎn)腸黏膜組織中IL-6、IL-17A均升高，與正常對(duì)照組IL-6(5.1±0.74)、IL-17A(18.1±1.60)比較，T1組IL-6(16.3±1.16)、IL-17A(29.2±2.49)含量均升高，T4組IL-6(53.4±2.99)、IL-17A(61.3±3.47)含量

11、均顯著升高，差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.01）。
　?。?）與空白對(duì)照組（0）比較，各時(shí)相點(diǎn)腸黏膜損傷程度評(píng)分均升高，其中T1組為（2.7±0.67），T4組（6.8±0.63）腸黏膜損傷最重，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.01)。
　?。?）將Th17、Treg、門靜脈血 IL-6、IL-17A，小腸組織IL-6、IL-17A表達(dá)與腸黏膜損傷評(píng)分呈正相關(guān)，r=0.972，0.969，0.973，0.962，0.970，0.96

12、1.P<0.01。Th17/Treg與腸黏膜損傷評(píng)分呈負(fù)相關(guān)，r=-0.814，P<0.01。將Th17、Treg、Th17/Treg、門靜脈血IL-6、IL-17A，小腸組織IL-6、IL-17A值作為自變量，腸黏膜損傷評(píng)分作為應(yīng)變量進(jìn)行多元線性回歸分析，顯示R=0.978；p<0.01。
　　結(jié)論：大鼠嚴(yán)重?zé)齻竽c道Th17/Treg細(xì)胞比例逐漸降低，腸黏膜組織及門靜脈血中IL-17A、IL-6逐漸升高，腸黏膜損傷加重，Th1