1、目的：探討氧化應激(oxidative stress)對胰島β細胞胰島素和C肽分泌功能的影響，并初步探討其可能機制。 方法：體外低糖培養(yǎng)RIN胰島β細胞，以葡萄糖/葡萄糖氧化酶(glucose/glucose oxidase，G/GO)為過氧化氫(hydrogen dioxide，H<,2>O<,2>)產生體系，作用于培養(yǎng)細胞，摸擬體內氧化應激水平。將細胞分為六組，A組為對照組，B、C、D、 E、F組分別加入終濃度為2mU/ml

2、、5mU/ml、10mU/ml、20mU/m1、20mU/ml的GO，并在F組加入終濃度為200U/ml的過氧化氫酶(hydrogen peFOXidase,CAT)，以DCFH-DA為細胞內H<,2>O<,2>熒光探針，以流式細胞術檢測細胞內H<,2>O<,2>，以RT-PCR方法檢測不同濃度G/G0體系作用下細胞內胰腺十二指腸同源異型盒(pancreas duodenum homeobox factor-1，PDX-1)的 mRNA

3、表達，并用化學發(fā)光法和放射免疫法檢測不同濃度G/GO體系作用下上清液的胰島素和C肽濃度。 結果：1．B、C、D、E四組，隨著加入G/G0體系中GO濃度的升高，細胞內產生的H<,2>O<,2>逐漸升高。2．隨著H<,2>O<,2>生成的增多，B、C、D、E四組細胞內PDX-1的mRNA的表達逐步減少，加入CAT清除H<,2>O<,2>，則細胞內PDX-1的mRNA的表達又明顯升高。3．隨著H<,2>O<,2>生成的增多，胰島β細胞

4、分泌的胰島素及C肽量也逐漸減少。加入CAT清除H<,2>O<,2>后則可部分逆轉這一趨勢。4．對各組細胞內H<,2>O<,2>的生成同PDX-1的表達進行相關性分析，再對細胞內PDX-1的 mRNA的表達程度和胰島素、C肽的分泌量進行相關性分析，發(fā)現(xiàn)H<,2>O<,2>的生成同PDX-1mRNA的表達成負相關，而PDX-1的mRNA的表達則同胰島素、C肽的分泌呈正相關。 結論：氧化應激可減少胰島β細胞內的PDX-1的mRNA的表