1、目的：探討重癥急性胰腺炎時胰腺組織一氧化氮(nitric-oxide，NO)和誘導型一氧化氮合酶(inducible nitric oxide synthase，iNOS)的表達變化以及葛根素對它們的影響。 方法：取54只健康雄性SD大鼠，體重250±30g，隨機分為三組：假手術組(C組)，重癥急性胰腺炎組(A組)，葛根素處理組(P組)，每組18只。采用10％水合氯醛(0.003ml/g)腹腔注射麻醉，A組逆行胰膽管內(nèi)加壓注射5

2、％?；悄懰徕c(0.1ml/100g，0.1ml/min)建立SAP模型；C組注射等量生理鹽水；P組手術前2h給以葛根素25mg/kg腹腔注射，按照SAP模型制做方法注入5％?；悄懰徕c，術后再以25mg/kg腹腔注射給藥一次。C組及A組于術前2h和術后腹腔注射等量5％葡萄糖注射液(葛根素溶劑)。每組于6h、12h、24h時間點處死大鼠(n=6)，檢測分析血及腹水淀粉酶變化，并測定腹水量的變化，給以大體病理組織評分，’取胰腺組織HE染色觀察

3、胰腺組織病理學變化，同時檢測胰腺組織NO水平以及總一氧化氮合酶(nitric oxide synthase，NOS)、誘導型一氧化氮合酶(inducible nitricoxide synthase，iNOS)和結構型一氧化氮合酶(constitutive nitric oxide synthase，cNOS)的活性，并用RT-PCR及免疫組織化學的方法檢測iNOSmRNA及蛋白水平的變化。 結果：A組相對于C組，在6h腹水量、

4、血和腹水淀粉酶明顯升高(P<0.01)，病理組織學評分也顯示有顯著增高(P<0.01)，表示胰腺組織已有明顯的損傷。隨時間延長，腹水量及血、腹水淀粉酶進一步增高，病理組織學評分也顯示胰腺組織損傷進一步加重，12h到達高峰，24h仍維持在較高水平(P<0.01)，而在12h和24h兩時間點各指標的變化無統(tǒng)計學差異(P>0.05)。同時，在6h時間點上，胰腺組織中NO水平、總NOS、iNOS活性相對于C組也明顯升高(P<0.01)，免疫組化

5、和RT-PCR結果也顯示iNOS蛋白及iNOS mRNA表達增高(P<0.01)。隨時間延長，在12h和24h各指標到達高峰，24h仍維持在較高水平(P<0.01)，在12h和24h兩時間點各指標無統(tǒng)計學差異(P>0.05)。cNOS活性在各時間點的差異無統(tǒng)計學意義(P>0.05)。 P組在6h點上在病理組織學評分、血及腹水淀粉酶、NO及iNOS活性、iNOSmRNA的表達和iNOS蛋白表達方面與A組6h無明顯統(tǒng)計學差異(P>0.05)

6、。但在12h和24 h，發(fā)現(xiàn)與A組相比，腹水量明顯下降，血和腹水淀粉酶明顯降低，大體組織病理評分和病理組織學評分也顯示胰腺組織損傷減輕，具有統(tǒng)計學差異(P<0.01或P<0.05)。同時，胰腺組織NO水平、總NOS和iNOS水平也明顯降低(P<0.01或P<0.05)，免疫組化和RT-PCR結果也顯示iNOS蛋白和iNOSmRNA表達降低(P<0.01)。P組cNOS活性在各時間點與A組相比差異無統(tǒng)計學意義(P>0.05)。P組內(nèi)三時間

7、點各指標無明顯統(tǒng)計學差異(P>0.05)。 A組和P組的NO水平與胰腺病理組織學評分之間在三個時間點上分別進行了相關分析(相關系數(shù)分別為r<,1>=0.881，r<,2>=0.899，r<,3>=0.930，P<0.01)，表明它們成正相關。 結論：1.在重癥急性胰腺炎時，隨著時間的延長，iNOS表達增高，從而產(chǎn)生高濃度的NO，加重胰腺組織的損傷。2.葛根素在重癥急性胰腺炎6h后，可以顯著降低iNOS的表達，使NO水平下