1、目的：通過對一常染色體顯性遺傳的先天性無虹膜家系進(jìn)行PAX6基因的突變篩查和臨床特點的觀察,以鑒定其是否是先天性無虹膜的致病基因并探討其致病機制。
　　方法：收集一常染色體顯性遺傳的先天性無虹膜家系,其中5例患者,11例表型正常的家系成員。對該家系無虹膜患者進(jìn)行視力、裂隙燈、眼底、眼壓、視野和房角的測量,繪制家系遺傳圖譜,分析該家系發(fā)病特點。在獲得知情同意的前提下,抽取該先天性無虹膜家系患者及其家族成員的外周靜脈血,酚-氯仿法提取

2、基因組DNA,根據(jù)文獻(xiàn)設(shè)計合成引物,聚合酶鏈反應(yīng)(PCR)擴(kuò)增PAX6基因的全部外顯子及外顯子內(nèi)含子連接處,擴(kuò)增產(chǎn)物經(jīng)DNA凝膠回收試劑盒純化后在ABI-3170自動測序儀上進(jìn)行直接測序,檢測PAX6基因的外顯子及其與內(nèi)含子交界處序列,測序結(jié)果采用DNAstar軟件進(jìn)行序列分析。并隨機抽取100名本地區(qū)無先天性無虹膜病史及家族史、與該家系無血緣關(guān)系的健康人群作為對照,抽取外周靜脈血,進(jìn)行PCR、測序檢測。
　　結(jié)果：1)該家系患者

3、均具有虹膜全部或部分缺失的臨床特點,符合先天性無虹膜的診斷。家系遺傳特點為以垂直方式從一代傳到下一代,連續(xù)傳遞,男女患病率均等,符合常染色體顯性遺傳的遺傳方式;2)在該家系患者中檢測到IVS9-1G>A剪接突變,該突變導(dǎo)致DNA剪接異常,從而使所編碼的蛋白質(zhì)發(fā)生改變,家系中的正常人及100例正常對照者的PAX6基因中均未發(fā)現(xiàn)突變。
　　結(jié)論：PAX6基因IVS9-1G>A剪接突變使DNA發(fā)生剪接異常,導(dǎo)致蛋白質(zhì)的改變,這可能是該家