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1、目的研究MIF在正常胰腺及胰腺癌組織中的分布情況;研究MIF與胰腺癌臨床分期與病理分級的關(guān)系;研究MIF在胰腺癌細胞系中的表達情況.構(gòu)建MIF RNA干擾載體導(dǎo)入胰腺癌細胞,建立穩(wěn)定表達MIF RNA干擾表達的胰腺癌細胞系.進一步研究MIF對胰腺癌細胞生長的影響;方法免疫組織化學(xué)方法研究胰腺癌、正常胰腺組織中MIF蛋白的表達;免疫細胞化學(xué)方法研究胰腺癌細胞系MIF蛋白的表達;RT-PCR技術(shù)研究胰腺癌細胞MIF基因的表達;構(gòu)建MIF R
2、NA干擾載體pRNAH1-MIF,脂質(zhì)體法將質(zhì)粒pRNAH1-MIF導(dǎo)入胰腺癌細胞系A(chǔ)SPC-1、PANC-1中.經(jīng)Zeocin篩選得到抗性克隆siRNA-MIF-ASPC-1、siRNA-MIF-PANC-1,轉(zhuǎn)移擴增建立穩(wěn)定的MIF knockdown細胞系.MTT法檢測轉(zhuǎn)染后胰腺癌細胞系的增殖活性.免疫細胞化學(xué)、RT-PCR、Westernblot技術(shù)研究轉(zhuǎn)染后胰腺癌細胞系MIF的表達情況.結(jié)論MIF在胰腺癌組織中高表達,且與腫瘤
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