兔脂肪干細胞的分離培養(yǎng)鑒定及成軟骨分化的實驗研究.pdf_第1頁
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文檔簡介

1、【目的】對兔脂肪來源的干細胞(rabbitadipose-derivedstemcells,RADSCs)的分離、培養(yǎng)和鑒定進行探討,并初步探討不同濃度轉化生長因子β3(TransformingGrowthFactor-β3,TGF-β3)促進RADSCs向軟骨細胞分化的可行性。為軟骨組織工程中種子細胞的選擇提供新思路。
　　【方法】取成年大耳白兔腹股溝部或頸背部脂肪組織,利用酶消化法和密度梯度離心法獲得細胞;進行原代和傳代培養(yǎng),

2、觀察細胞變化并繪制細胞生長曲線;流式細胞術和免疫熒光技術鑒定細胞表面CD分子;將獲取的第三代細胞進行體外成軟骨細胞誘導,分別于誘導的第1W、2W、3W進行形態(tài)學觀察、甲苯胺藍染色、阿利新藍染色和Ⅱ型膠原(ColⅡ)的免疫組化染色。
　　【結果】所獲取細胞呈類成纖維細胞樣貼壁快速生長,生長曲線呈比較典型的“S”型;傳代后生長、增殖穩(wěn)定可達20代以上;細胞表面抗原CD34、CD45呈陰性反應,CD44、CD29呈陽性反應,陽性率達97

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