1、惡性腫瘤嚴重危害著人類身體健康。因此，尋找治療腫瘤的有效方法是目前研究的熱點和難點。在我國，隨著人們生活水平的不斷提高，結直腸癌的發(fā)病率有逐年上升的趨勢。目前臨床上主要采用以手術為主、化療和放療為輔的綜合治療手段，但效果并不理想，因此，仍需探索更加有效的新療法。細胞內信號傳導通路參與調節(jié)細胞凋亡、增生、分化和代謝等一系列生理活動。研究發(fā)現(xiàn)腫瘤的增殖、抗凋亡、轉移等生物學行為與細胞信號通路異常有關。因此，能否在這一方面尋求一條新的治療腫瘤

2、的出路是很有前景和挑戰(zhàn)性的課題。
　　 肝細胞生長因子(Hepatocyte Grouth Factor，HGF)是一種由多種細胞分泌的多肽生長因子，具有強促分裂、組織成形、誘導上皮細胞遷移、侵襲以及誘導血管生成等作用。有研究表明，在結直癌患者中與正常組相比較，血清中HGF含量顯著升高，且分期越晚，HGF值越高，而其中合并肝轉移的結直癌患者較之無轉移的結直癌患者，HGF值更高。因此認為HGF參與了結直腸癌的生長、轉移。HGF通過

3、與其受體c-Met結合進而導致包括磷脂酰肌醇3激酶(phosphoinositide3-kinases，PI3K)-蛋白激酶B(protein kinaseB，AKT/PKB)在內的多個信號通路引起一系列生物效應，從而發(fā)揮其生理作用的。被激活的PI3K可使AKT磷酸化，來調節(jié)管理細胞代謝、生存、凋亡、分化和增殖等一系列生理活動。有研究表明，AKT/PKB參與了多種腫瘤的發(fā)生、發(fā)展及侵襲轉移。腫瘤組織中AKT/PKB活性水平高可以是其上游

4、調節(jié)異常造成的，所以通過抑制HGF/c-Met介導的信號通路來抑制腫瘤生長、侵襲和轉移目前正逐漸成為腫瘤治療研究的新方向。我們在前期研究中發(fā)現(xiàn)，HGF具有促進人結腸癌細胞SW620增殖、遷移等作用，但其作用機制尚未闡明。
　　 目前抑制HGF/c-Met介導的生物學活性方法有多種，包括：HGF的拮抗劑、RNA干擾技術等方法，關于抑制HGF下游信號傳導通路PI3K/AKT后是否即可抑制HGF促進結直腸癌的增殖、侵襲作用的研究報道不

5、多。
　　 目的：探討PI3K/AKT信號通路在HGF促進結腸癌SW620細胞增殖、侵襲中所起到的作用，以期為探求一條新的結直腸癌治療途徑提供理論依據。
　　 方法：
　　 1.用MMT法分析檢測PI3K/AKT信號通路在HGF促進人結腸癌細胞SW620增殖中的作用。
　　 2.用流式細胞術檢測PI3K/AKT信號通路在HGF調節(jié)人結腸癌細胞SW620細胞周期、抗凋亡中的作用。
　　 3.用劃痕實

6、驗觀察PI3K/AKT信號通路在HGF促進人結腸癌細胞SW620細胞移行中的作用。
　　 結果：
　　 1.LY294002對SW620增殖的影響應用MTT法結果顯示，實驗組加入LY294002作用48h，濃度＞20μmol/L三實驗組與對照組OD值比較差異有顯著性(P＜0.05)，且這三個濃度組間OD值比較差異有顯著性(P＜0.05)。終濃度為10μmol/L、5μmol/LLY294002組、DMSO組與對照組之間O

7、D值比較差異無顯著性(P＞0.05)。
　　 2.LY294002對SW620凋亡、細胞分裂周期的影響流式細胞術結果顯示，隨LY294002濃度下降SW620凋亡率呈下降趨勢，各實驗組與對照組比較差異均有有顯著性差異(P＜0.05)。SW620增值指數(shù)(PI)％隨LY294002濃度下降呈升高趨勢，與對照組比較有顯著性差異(P＜0.05);10μmol/L與對照組比較無顯著性差異(P＞0.05)。
　　 3.LY2940

8、02對SW620移行的影響劃痕實驗結果顯示，培養(yǎng)細胞3天，測量劃痕空隙寬度，在同一天內實驗組移行距離較對照組短，實驗組與對照組比較差異有顯著性(P＜0.5)，DMSO組與對照組比較差異無顯著性(P＞0.05)。
　　 結論：
　　 1.LY294002抑制PI3K/AKT信號途徑后能夠抑制HGF對人結腸癌細胞SW620增殖的促進作用，且抑制作用與濃度相關。
　　 2.LY294002抑制PI3K/AKT信號途徑后