在多藥耐藥胃癌細(xì)胞中轉(zhuǎn)化生長(zhǎng)因子-β1對(duì)細(xì)胞增殖的影響及機(jī)制的研究.pdf_第1頁(yè)
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1、目的:研究轉(zhuǎn)化生長(zhǎng)因子-β1(transforminggrowthfactorβ1,TGF-β1)對(duì)SNU-601/cis2多藥耐藥胃癌細(xì)胞增殖的影響及機(jī)制。 方法:實(shí)驗(yàn)分為兩組;即對(duì)照組:不加TGF-β1的SNU-601/cis2多藥耐藥胃癌細(xì)胞;實(shí)驗(yàn)組:加10ng/mL濃度的TGF-β1SNU-601/cis2多藥耐藥胃癌細(xì)胞,每組細(xì)胞分別培養(yǎng)24、48和72h。在倒置顯微鏡下觀察細(xì)胞生長(zhǎng)情況,應(yīng)用MTT方法檢測(cè)對(duì)照組和實(shí)驗(yàn)

2、組各時(shí)間段的細(xì)胞生長(zhǎng)抑制率,并用免疫細(xì)胞化學(xué)技術(shù)及Westernblotting技術(shù)檢測(cè)c-myc,突變型p53和cyclinD1蛋白的表達(dá)水平。 結(jié)果:MTT結(jié)果,實(shí)驗(yàn)組SNU-601/cis2多藥耐藥胃癌細(xì)胞生長(zhǎng)抑制率逐漸增高,具有濃度和時(shí)間依賴(lài)性,與對(duì)照組相比抑制率明顯增高(P<0.001)。倒置顯微鏡觀察,對(duì)照組SNU-601/cis2細(xì)胞數(shù)量隨培養(yǎng)時(shí)間的延長(zhǎng)明顯增多,而實(shí)驗(yàn)組SNU-601/cis2細(xì)胞的數(shù)量在各時(shí)間段

3、與對(duì)照組相比明顯減少。免疫細(xì)胞化學(xué)染色結(jié)果,在24、48和72h時(shí)對(duì)照組細(xì)胞c-myc和突變型p53蛋白的表達(dá)均呈強(qiáng)陽(yáng)性,而實(shí)驗(yàn)組SNU-601/cis2細(xì)胞的c-myc和突變型p53蛋白的表達(dá)逐漸降低,具有時(shí)間依賴(lài)性;CyclinD1蛋白的表達(dá)在對(duì)照組和實(shí)驗(yàn)組SNU-601/cis2細(xì)胞中均呈陽(yáng)性或強(qiáng)陽(yáng)性。Westernblotting結(jié)果,實(shí)驗(yàn)組SNU-601/cis2細(xì)胞的c-myc和突變型p53蛋白的表達(dá)逐漸降低,各時(shí)間段與對(duì)照

4、組相比具有顯著性差異(P<0.01);cyclinD1蛋白的表達(dá)在實(shí)驗(yàn)組SNU-601/cis2細(xì)胞中24和48h與對(duì)照組相比明顯降低(P<0.05),而72h時(shí)其表達(dá)明顯增強(qiáng)與對(duì)照組相比無(wú)明顯差異(P>0.05)。 結(jié)論:TGF-β1可濃度和時(shí)間依賴(lài)性抑制SNU-601/cis2多藥耐藥胃癌細(xì)胞增殖,其機(jī)制與抑制c-myc和突變型p53蛋白的表達(dá)有關(guān),cyclinD1蛋白可能參與早期TGF-β1對(duì)多藥耐藥胃癌細(xì)胞的抗增殖作用。

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