1、藥物的安全、有效是貫穿藥物研發(fā)和臨床使用的核心環(huán)節(jié)，藥物的毒性也是上市藥物召回的最直接原因，因而新藥開發(fā)早期的毒性研究是藥物成功上市的關(guān)鍵影響因素。近年來，模式生物斑馬魚已經(jīng)成為藥物毒性篩選和評價的首選模型。隨著研究的不斷深入，研究發(fā)現(xiàn)斑馬魚魚體對藥物吸收的差異性直接影響毒性實驗結(jié)果，因而需要在斑馬魚毒性實驗的同時對斑馬魚魚體內(nèi)藥物含量進行監(jiān)測從而進行全面的毒性分析和評價。本研究旨在建立并提供靈敏、有效的LC-MS/MS輔助評價體系，研

2、究斑馬魚體內(nèi)藥物的毒性與吸收。本文將從以下兩個部分進行研究:
　　第一部分主要介紹檢測斑馬魚體內(nèi)藥物吸收的LC-MS/MS分析方法的建立。包括應(yīng)用MRM掃描模式建立適用于分析四類不同極性藥物的LC-MS/MS定量分析方法，及對定量分析方法的優(yōu)化，并且對已建立的四類不同極性藥物的LC-MS/MS定量分析方法進行方法學(xué)驗證;第三節(jié)為建立頭孢菌素MS數(shù)據(jù)庫，并應(yīng)用IDA建立sMRM-EPI方法分析斑馬魚毒性試驗中其體內(nèi)的頭孢菌素。

3、>　　第二部分主要介紹LC-MS/MS分析方法在斑馬魚胚胎毒性試驗中的應(yīng)用。第一節(jié)為藥物的斑馬魚毒性反應(yīng)與其體內(nèi)的吸收研究，包括斑馬魚不同給藥發(fā)育時期給藥劑量與其體內(nèi)藥物含量的關(guān)系，和藥物在斑馬魚不同給藥發(fā)育時期的毒性反應(yīng)及表型;第二節(jié)應(yīng)用已建立的LC-MS/MS方法定量頭孢菌素及其雜質(zhì)在斑馬魚體內(nèi)的含量，及斑馬魚毒性試驗中氨基糖苷類藥物的體內(nèi)含量;第三節(jié)應(yīng)用ADMETPredictor軟件預(yù)測抗生素在斑馬魚體內(nèi)的吸收，依據(jù)吸收系數(shù)Ka

4、值研究抗生素的斑馬魚體內(nèi)吸收，并應(yīng)用ADME Predictor模型驗證藥物的體內(nèi)吸收。
　　通過上述研究，本文已建立了靈敏、準(zhǔn)確的適用于檢測斑馬魚體內(nèi)不同極性藥物的MRM LC-MS/MS定量分析方法，該方法符合生物樣品體內(nèi)分析的定量分析方法的方法學(xué)要求。通過監(jiān)測斑馬魚毒性反應(yīng)中其體內(nèi)的藥物含量，揭示藥物毒性與其體內(nèi)濃度密切相關(guān)，可為進一步對藥物毒性結(jié)果的解釋和深入研究提供依據(jù);吸收系數(shù)Ka及ADMET Predictor軟件對