1、甘蔗梢腐病是世界范圍內(nèi)重要的經(jīng)濟(jì)作物真菌性病害，其病原真菌為輪枝鐮孢菌(F.verticillioides)和層出鐮刀菌(F.proliferatum)。通過(guò)農(nóng)桿菌介導(dǎo)的遺傳轉(zhuǎn)化分別構(gòu)建了這兩個(gè)鐮刀菌種（菌株CNO-1和YN41）的突變體庫(kù)，并利用高效TAIL-PCR和菌落形態(tài)對(duì)突變體庫(kù)進(jìn)行鑒定。
　　結(jié)果分別構(gòu)建了庫(kù)容量為195的YN41突變體庫(kù)和庫(kù)容量為956的CNO-1突變體庫(kù)。從兩個(gè)突變體庫(kù)中分別隨機(jī)挑選6個(gè)轉(zhuǎn)化子，進(jìn)行P

2、CR鑒定，結(jié)果均為陽(yáng)性。通過(guò)菌落特征和致病性篩選YN41和CNO-1突變體庫(kù)，鑒定出生長(zhǎng)速度減慢且致病力下降突變體1個(gè)(A5)，生長(zhǎng)速度減慢且致病力不變突變體1個(gè)(C8)，生長(zhǎng)速度加快且致病力增強(qiáng)突變體2個(gè)(A1、A2)，菌絲變濃密且菌絲疏水性變?nèi)跬蛔凅w1個(gè)(A3);采用高效TAIL-PCR對(duì)這些轉(zhuǎn)化子的T-DNA側(cè)翼序列進(jìn)行擴(kuò)增，獲得了A1、A2、A3突變體的T-DNA側(cè)翼序列，通過(guò)BLAST鑒定到其插入位點(diǎn)（下游）基因，這些基因分別