1、腎臟纖維化是絕大多數(shù)慢性腎臟疾病的終末期過程，其主要病理特征是腎間質(zhì)細(xì)胞增生和細(xì)胞外基質(zhì)(ECM)異常積聚。目前關(guān)于腎臟纖維化的確切發(fā)病機(jī)制仍然不完全清除，同時(shí)也沒有發(fā)現(xiàn)預(yù)防和治療腎臟纖維化確切有效的措施。近年來的研究表明，多種細(xì)胞因子參與了腎臟纖維化過程，在這些細(xì)胞因子當(dāng)中，結(jié)締組織生長(zhǎng)因子(CTGF)的作越來越得到重視，本課題觀察了重組人結(jié)締組織生長(zhǎng)因子(rhCTGF)對(duì)于體外培養(yǎng)的人腎小管上皮細(xì)胞和腎間質(zhì)成纖維細(xì)胞增殖及膠原合成的

2、影響，從而研究CTGF與腎臟纖維化的關(guān)系。 來氟米特(LEF)是近年來發(fā)現(xiàn)具有抗組織纖維化的藥物之一，該藥物最初是用在治療類風(fēng)濕疾病中的一種免疫抑制劑，近些年又用于治療一些腎臟疾病，并且取得了不錯(cuò)的療效，同時(shí)發(fā)現(xiàn)對(duì)肝臟、皮膚等組織具有抗纖維化形成的作用，那么是否它在防治腎臟纖維化中同樣有著很好的效果呢?本課題觀察了來氟米特活性代謝產(chǎn)物A771726對(duì)于體外培養(yǎng)的人腎小管上皮細(xì)胞和間質(zhì)成纖維細(xì)胞增殖及膠原合成的影響，同時(shí)在研究CT

3、GF對(duì)腎臟細(xì)胞促纖維化過程的基礎(chǔ)上，進(jìn)一步觀察A771726對(duì)上述過程的干預(yù)作用。 第一部分CTGF和LEF對(duì)人腎小管上皮細(xì)胞及間質(zhì)成纖維細(xì)胞增殖的作用目的研究結(jié)締組織生長(zhǎng)因子和來氟米特對(duì)體外培養(yǎng)的人腎小管上皮細(xì)胞和間質(zhì)成纖維細(xì)胞的增殖的影響。 方法用MTT法觀察不同濃度rhCTGF(0.1-100ng/ml)和A771726(0.5-500ug/ml)分別作用于體外培養(yǎng)的人腎小管上皮細(xì)胞和間質(zhì)成纖維細(xì)胞后細(xì)胞增殖受到的

4、影響；在此基礎(chǔ)上，觀察兩種藥物聯(lián)合對(duì)細(xì)胞增殖的影響。 結(jié)果在rhCTGF作用組中腎小管上皮細(xì)胞的增殖無明顯變化(P＞0.05)，成纖維細(xì)胞的增殖增加(P＜0.01)；在A771726作用組中，腎小管上皮細(xì)胞和間質(zhì)成纖維細(xì)胞的增殖均受到抑制(P＜0.01)，兩種干預(yù)因素共同作用時(shí)，兩種細(xì)胞的增殖均受到不同程度的抑制(P＜0.01)。 結(jié)論CTGF能夠誘導(dǎo)腎間質(zhì)成纖維細(xì)胞的增殖但對(duì)小管細(xì)胞的增殖無明顯影響；LEF能夠抑制兩種

5、細(xì)胞的增殖，同時(shí)對(duì)CTGF誘導(dǎo)的細(xì)胞增殖也有抑制作用。 第二部分CTGF和LEF對(duì)腎小管上皮細(xì)胞及間質(zhì)成纖維細(xì)胞膠原合成的影響目的研究結(jié)締組織生長(zhǎng)因子和來氟米特對(duì)體外培養(yǎng)的人腎小管上皮細(xì)胞和間質(zhì)成纖維細(xì)胞膠原合成的影響。 方法在第一部分實(shí)驗(yàn)基礎(chǔ)上，用不同濃度rhCTGF和A771726分別作用及聯(lián)合作用于培養(yǎng)的腎臟細(xì)胞，獲得作用后的細(xì)胞外液，應(yīng)用ELISA法測(cè)定其中Ⅰ型、Ⅳ型膠原的含量的變化。 結(jié)果rhCTGF干