1、DNA疫苗是一種能激發(fā)抗原特異性免疫的方法。新型納米材料細菌納米磁小體(BacterialMagneticParticles，BMP)是趨磁性細菌體內(nèi)依靠生物礦化法合成的磁性納米顆粒，主要由磁核和包被磁核的脂質膜組成。BMP本身所特有的獨特性質，使其在許多領域得到廣泛的應用，但作為基因載體的應用還很少。在本研究中，我們將基因疫苗pSLC-E7-Fc作為模型，該疫苗是運用HPV-16E7作為靶抗原，兩邊分別與次級淋巴組織趨化因子(SLC)

2、和IgGFc片段基因重組。應用BMP作為載體，連接pSLC-E7-Fc形成復合疫苗(BMP-V)，進行腫瘤免疫治療，優(yōu)化BMP在體外和體內(nèi)進行基因傳遞的條件。
　　 將BMP與DNA分別在生理鹽水，pH=3,4,5,6，7，8，9的PBS中連接，結果表明與生理鹽水相比，在pH=4～5的PBS中BMP連接DNA更加有效(96％vs79.5%,P＜0.05)。
　　 電子顯微鏡顯示BMP-V的大小和形態(tài)與未連接基因的BMP相

3、似，仍然具有均質性，直徑＜100nm。
　　 半定量RT-PCR和流式細胞儀結果表明，BMP-V在體外有效轉染的條件是用600-mT磁場作用10min。
　　 小動物體內(nèi)成像實驗顯示磁場在BMP-V在體內(nèi)轉染過程中起著很重要的作用。
　　 以免疫原性較差的小鼠TC-1腫瘤為模型，BMP-V治療小鼠皮下腫瘤模型時，與對照PBS組相比,5μgBMP-V治療小鼠組的腫瘤明顯比對照PBS組小(P＜0.05)，生存期延長1

4、5.6天，但與其他劑量組(40μg，20μg，10μg)無統(tǒng)計學差異(P＞0.05)，說明BMP-V在小鼠體內(nèi)治療中能達到微克級。
　　 在BMP-V治療小鼠肺轉移模型中，磁場作用的最佳時間與體外轉染條件相同，均為10min。而BMP-V免疫的最佳方式則是皮下注射+磁場作用，其肺重比PBS對照組明顯?。?96.56±64.209mgvs642.02±71.873mg，P＜0.05），腫瘤結節(jié)明顯減少(42.6±8.28387vs

5、194.8±23.64849,P＜0.05)。
　　 為分析BMP-V抗腫瘤效應的機制，進行了CTL活性檢測和病理切片檢查。結果表明，與對照PBS組相比，BMP-V免疫的小鼠顯示了E7特異的CTL活性。在其腫瘤中有大量的腫瘤浸潤性淋巴細胞。這說明BMP-V可誘導有效的抗原特異性的細胞免疫應答。
　　 用ELISA方法檢測，結果表明小鼠體內(nèi)不會產(chǎn)生抗BMP的抗體，說明BMP無明顯免疫原性，BMP-V產(chǎn)生的抗腫瘤效應是由所攜