1、肺炎支原體(Mp)是人類呼吸道感染的常見病原體,近年來肺炎支原體感染有逐漸增多的趨勢,在社區(qū)獲得性肺炎中占據(jù)重要地位。大環(huán)內(nèi)酯類抗生素是治療肺炎支原體感染的首選藥物,但近年研究發(fā)現(xiàn)大環(huán)內(nèi)酯類抗生素對肺炎支原體的耐藥率較高。喹諾酮類抗生素是治療肺炎支原體感染的常用藥物,尤其是新一代喹諾酮類抗生素增強了對肺炎支原體的抗菌活性。喹諾酮類藥物的作用機制是干擾細胞的DNA復制,其作用的靶位是DNA促旋酶和拓撲異構酶Ⅳ。目前未發(fā)現(xiàn)對喹諾酮類藥物耐藥

2、的肺炎支原體。但在人類支原體中,臨床上已經(jīng)分離出對喹諾酮類藥物耐藥的人型支原體和解脲支原體。通過擴增喹諾酮耐藥決定區(qū)的gyrA、gyrB、parC和parE基因,已證實人型支原體和解脲支原體的耐藥與gyrA和parC基因的點突變有關。本研究以藥物選擇性-基因突變-耐藥形成理論為出發(fā)點,采用人工誘導的方式,用喹諾酮類抗生素環(huán)丙沙星、左氧氟沙星、加替沙星對肺炎支原體標準株FH進行體外誘導,使之逐步產(chǎn)生耐藥性,通過測定誘導后耐藥株對環(huán)丙沙星、

3、左氧氟沙星、加替沙星的最低抑菌濃度(MIC),檢測耐藥程度的變化。并擴增耐藥株的喹諾酮耐藥決定區(qū)的gyrA、gyrB、parC和parE基因,明確耐藥性的產(chǎn)生與喹諾酮耐藥決定區(qū)基因突變的關系,為肺炎支原體感染的防治提供理論依據(jù)和對策。
　　 目的：探討在亞抑菌濃度喹諾酮類藥物多代培養(yǎng)后,肺炎支原體標準株FH對喹諾酮類藥物敏感性的變化及其機制。
　　 方法將肺炎支原體標準株FH在含有亞抑菌濃度環(huán)丙沙星、左氧氟沙星和加替沙星

4、的液體培養(yǎng)基中傳代培養(yǎng)后,.測誘導后菌株的最低抑菌濃度。提取標準株及誘導耐藥株的DNA,應用聚合酶鏈反應擴增喹諾酮耐藥決定區(qū)(QRDR)的gyrA、gyrB、parC和parE基因。測序分析耐藥株的基因突變情況。
　　 結果：經(jīng)亞抑菌濃度喹諾酮類藥物多代培養(yǎng)誘導后,肺炎支原體標準珠FH出現(xiàn)對誘導藥物的耐藥及交叉耐藥。6株藥物誘導耐藥株中,在左氧氟沙星誘導的耐藥株中gyrA基因編碼的95位蛋氨酸轉(zhuǎn)變?yōu)楫惲涟彼?parC基因編碼的8