1、目的：以高生育力和不育精子為研究對象，通過差異熒光二維電泳技術（DIGE）和質譜技術尋找和建立兩種精子差異蛋白圖譜，并對某些關鍵性的蛋白進行功能分析，以期揭示導致精子生育能力低下的分子以及細胞調控的機制。 材料和方法：收集在精子庫里連做15個AID周期一次也未能成功的供精者的精液和AID成功率在50％以上的供精者的精液，各10人。每人捐獻3次。所有志愿者都簽署了供精知情同意書。 運用Percoll密度梯度離心技術分離精子

2、，硫脲/尿素法結合超聲法提取蛋白，2-D DIGE技術進行差異蛋白質組分離。將高生育力精子和低生育力精子分別用Cy3，Cy5熒光染料標記，各取兩樣本的一半混合作為內標用Cy2標記。為了獲得有統(tǒng)計學意義的差異蛋白點，再將兩樣本反向標記進行2D-DIGE。圖像經過DeCyder差異分析軟件進行分析。結合膠內酶解和質譜鑒定技術對分析出的差異蛋白點進行身份鑒定。 結果：本實驗采用了熒光差異二維電泳（DIGE）對不同生育能力精子蛋白進行分