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文檔簡介
1、目的:探討乙型肝炎病毒(HBV)X蛋白(HBx)對體外培養(yǎng)的小鼠足細胞補體調節(jié)蛋白CD59和Crry表達的影響。
方法:培養(yǎng)的小鼠足細胞分為乙型肝炎病毒(HBV)X基因轉染組(Ad-X)、空白足細胞組(B)和腺病毒空載體轉染組(Ad),PT-PCR和流式細胞術檢測HBVX基因轉染對CD59和Crry基因和蛋白的表達,MTT法檢測其對補體激活的影響;觀察ERK1/2、P38MAPK、PI-3K通路抑制劑對足細胞CD59和Cr
2、ry表達的影響。
結果:與空白足細胞組(B)相比,腺病毒空載體組(Ad)對小鼠足細胞CD59和Crry的基因和蛋白表達無顯著影響(P值均>0.05),轉染HBVX基因組(Ad-X)CD59在蛋白表達水平上顯著高于B組(P<0.005)和Ad組(P<0.005),在基因表達水平上也明顯高于B組(P<0.05)和Ad組(P<0.05)。Ad-X組Crry在蛋白表達水平上顯著高于B組(P<0.005)和Ad組(P<0.005),
3、在基因表達水平上也明顯高于B組(P<0.05)和Ad組(P<0.05)。通路抑制劑加入Ad-X組后,SB203580組與無抑制劑的Ad-X組比較,CD59蛋白表達明顯降低(P<0.01),Crry蛋白表達也明顯降低(P<0.01)。LY294002組、U0126組、DMSO組與無抑制劑的Ad-X組比較CD59和Crry蛋白的表達無顯著差異(P值均>0.05)。MTT法提示在各個血清稀釋點上,Ad-X組細胞裂解抑制率均明顯高于B組和Ad組
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