1、鉤栗為殼斗科栲屬常綠喬木，材質(zhì)堅(jiān)硬，屬紅錐類(lèi)，分布廣泛，是我國(guó)具有重要開(kāi)發(fā)前景的珍貴用材樹(shù)種。本文以湖南、湖北和福建的9個(gè)鉤栗野生居群共111個(gè)樣本的葉片為研究對(duì)象，利用ISSR分子標(biāo)記的方法探討了它們的遺傳關(guān)系，評(píng)價(jià)了9個(gè)鉤栗野生居群的遺傳多樣性及遺傳結(jié)構(gòu)，這為鉤栗資源的搜集保存和開(kāi)發(fā)利用提供了科學(xué)依據(jù)。結(jié)論如下:
　　1.建立了鉤栗ISSR-PCR最佳反應(yīng)體系。即:20μL反應(yīng)總體系中，含30ng模板DNA，3mmol/L M

2、g2+，0.4mmol/L dNTPs，0.75U Taq DNA聚合酶，0.3μmol/L引物。
　　2.篩選出了10條條帶清晰多態(tài)性好且可用于遺傳結(jié)構(gòu)分析的多態(tài)性引物。利用100條引物分別對(duì)111份鉤栗基因組DNA進(jìn)行PCR擴(kuò)增，共擴(kuò)增出158條清晰條帶，其中多態(tài)性條帶141條，多態(tài)性條帶百分率(P)平均為89.01％。每個(gè)引物擴(kuò)增的條帶數(shù)目在13～19條之間，平均每條引物擴(kuò)增出15.1條條帶。每個(gè)居群的多態(tài)性條帶百分率在84

3、.81％～93.67％之間，其中周寧居群最低，永順居群最高。
　　3.鉤栗居群具有較高的遺傳多樣性和變異度。數(shù)據(jù)分析發(fā)現(xiàn)鉤栗9個(gè)居群間遺傳分化系數(shù)(Gst)為0.1855，這表明遺傳變異大部分存在于居群內(nèi)，即居群內(nèi)的遺傳變異占總變異量的81.45％?；蛄鳎∟m*）為2.1960，Nm*＞1，結(jié)果顯示，鉤栗居群間的基因流水平可以防止遺傳漂變的作用，降低局部產(chǎn)生的變異，維系居群間的相似性。Nei's基因多樣性指數(shù)、Shannon's

4、信息指數(shù)、總種群基因多樣度(Ht)、各種群基因多樣度(Hs)分別為0.3323、0.4920、0.4108、0.3346，綜合各項(xiàng)參數(shù)說(shuō)明鉤栗居群具有較高的遺傳多樣性和變異度。
　　4.鉤栗居群地理距離的遠(yuǎn)近是影響居群遺傳變異的主要因素。聚類(lèi)分析結(jié)果表明，采自福建的邵武、建甌、建陽(yáng)、屏南和周寧居群聚在一起;恩施和桑植居群聚在一起;永順和瀏陽(yáng)居群聚為一起，種群遺傳變異分布模式基本上與其地理生態(tài)格局一致。各居群間的遺傳距離差異較大，其

5、中，邵武與建甌居群的遺傳距離最近，僅為0.0815;瀏陽(yáng)和周寧居群的遺傳距離最遠(yuǎn)，為0.1984。
　　5.環(huán)境因子中的坡位、年降水量、經(jīng)度及緯度是影響鉤栗遺傳多樣性的主導(dǎo)因子。環(huán)境因子的相關(guān)性與9個(gè)鉤栗種群的遺傳多樣性檢測(cè)中，環(huán)境因子里的海拔和年平均氣溫與鉤栗種群的各遺傳多樣性參數(shù)呈現(xiàn)負(fù)相關(guān)關(guān)系，說(shuō)明它們之間存在微弱的相關(guān)關(guān)系，在一定程度上影響了鉤栗種群間的基因交流;坡位、年降水量、經(jīng)度及緯度與各遺傳多樣性指數(shù)呈現(xiàn)明顯的正相關(guān)關(guān)