1、目的:
　　觀察羅格列酮和腫瘤壞死因子α(TNF-α)對脂肪細胞線粒體生物合成和ZAG表達的影響。
　　方法:
　　體外培養(yǎng)3T3-L1前脂肪細胞并誘導分化為成熟脂肪細胞,分別以不同濃度的羅格列酮和TNF-α干預48h,提取總RNA,采用RT-PCR方法檢測PGC-1α、TFAM、NRF-1/2及ZAG mRNA表達水平。在此實驗的基礎上,驗證羅格列酮和TNF-α對脂肪細胞線粒體合成相關因子及ZAG表達的影響,將分化成

2、熟的脂肪細胞隨機分為四組:對照組、羅格列酮組(50μM)、TNF-α組(30ng/mL)、羅格列酮+TNF-α組(RT組),采用RT-PCR和Western Blot技術檢測PGC-1α、TFAM、NRF-1/2及ZAG mRNA和蛋白表達;采用線粒體特異性染料Mito Traker Green預染成熟脂肪細胞,激光共聚焦顯微鏡下觀察線粒體熒光強度;采用 ELISA法測定細胞培養(yǎng)液上清中FFA濃度。
　　結果:
　　1、羅格

3、列酮單獨干預分化成熟的3T3-L1脂肪細胞,ZAG及 PGC-1α、TFAM、NRF-1/2 mRNA表達水平均高于對照組(P<0.01);
　　2、TNF-α單獨干預分化成熟的3T3-L1脂肪細胞,ZAG及PGC-1α、TFAM、NRF-2 mRNA表達水平均低于對照組(P<0.01),且以TNF-α組(100ng/mL)降低最為顯著;TNF-α組(10-100ng/mL)NRF-1mRNA表達水平低于對照組(P<0.01),但

4、TNF-α組(1ng/mL) NRF-1 mRNA表達無顯著差異(P>0.05);
　　3、羅格列酮(50μM)和TNF-α(30ng/mL)干預3T3-L1脂肪細胞48h,羅格列酮組和羅格列酮+TNF-α組線粒體熒光強度高于對照組,而TNF-α組線粒體熒光強度低于對照組;
　　4、羅格列酮(50μM)和TNF-α(30ng/mL)干預3T3-L1脂肪細胞48h,羅格列酮組ZAG、PGC-1α、TFAM、NRF-1/2 mR

5、NA表達水平均高于對照組(P<0.01);TNF-α組ZAG、PGC-1α、TFAM、NRF-1/2 mRNA表達水平均低于對照組(P<0.01);羅格列酮+TNF-α組ZAG、TFAM、NRF-2 mRNA表達水平高于對照組(P<0.01),而NRF-1mRNA表達水平低于對照組(P<0.05),PGC-1α mRNA表達差異無顯著性(P>0.05);
　　5、羅格列酮(50μM)和TNF-α(30ng/mL)干預3T3-L1脂

6、肪細胞48h,羅格列酮組ZAG、NRF-1和PGC-1α、TFAM蛋白表達水平高于對照組(分別為P<0.05, P<0.01),NRF-2蛋白表達差異無顯著性(P>0.05);TNF-α組ZAG、NRF-1和TFAM、NRF-2蛋白表達水平低于對照組(分別為 P<0.05,P<0.01),PGC-1α蛋白表達著差異無顯性(P>0.05);羅格列酮+TNF-α組ZAG和PGC-1α蛋白表達水平高于對照組(分別為P<0.01,P<0.05)

7、,NRF-2蛋白表達水平低于對照組(P<0.01),TFAM、NRF-1蛋白表達差異無顯著性(P>0.05);
　　6、羅格列酮(50μM)和TNF-α(30ng/mL)干預3T3-L1脂肪細胞48h,羅格列酮組 FFA濃度低于對照組,TNF-α組 FFA濃度高于對照組,差異均有顯著性(P<0.05),羅格列酮+TNF-α組濃度表達差異無顯著性(P>0.05)。
　　結論:
　　1)羅格列酮促進脂肪細胞ZAG和PGC-