1、目的：對ApoE基因敲除小鼠進行粥樣硬化造模，并驗證造模是否成功。從噬菌體重組抗體庫中篩選獲得靶向Vcam-1的單鏈抗體，鑒定其親和性并與單克隆抗體效價進行比較。
　　方法：9周齡ApoE基因敲除小鼠用D12108C高脂飼料喂養(yǎng)4個月后取3只以18F-FDG小動物PET顯示動脈內粥樣斑塊的炎癥病變，并取其動脈組織用western blotting、病理切片及免疫組化顯示粥樣斑塊存在及斑塊內Vcam-1分子表達情況，另設3只普通C5

2、7BL/6小鼠作為對照。擴增Vcam-1基因克隆質粒并轉入真核細胞中表達獲得Vcam-1抗原蛋白，純化后用該蛋白包被免疫管，通過四輪壓力逐漸增大的“吸附-洗脫-擴增”過程篩選獲得陽性克隆。對陽性克隆進行ELISA檢測，選取效價高的克隆送予測序并轉入大腸桿菌進行表達，認定高表達的樣品為最終的陽性克隆。將最終的陽性克隆轉染入感受態(tài)細胞表達單鏈抗體，純化的單鏈抗體經ELISA檢測并評價其抗原親和性。
　　結果：造模小鼠尾靜脈注射18F-

3、FDG一小時后行小動物PET顯像，主動脈部位可見顯像劑濃聚，與正常小鼠對比明顯。HE切片可見動脈內粥樣斑塊組織，western blotting檢測顯示粥樣硬化動脈組織內有Vcam-1分子表達，組化切片定位Vcam-1分子主要在斑塊內炎癥細胞上。真核細胞表達的Vcam-1抗原蛋白的分子量為85-90kDa，以Vcam-1抗原蛋白為免疫原篩選四輪所得的陽性克隆進行單噬菌體ELISA檢測，從檢測結果中選取9個效價高的克隆經基因測序共獲得3個