兒茶素酶促低聚反應的初步研究和紅茶酯提取物的分離及活性分析.pdf_第1頁
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文檔簡介

1、兒茶素低聚合物具有良好的生物活性如抗動脈粥樣硬化、防止皮膚癌等,有些活性甚至高于兒茶素單體,其形成條件和途徑比較復雜。本試驗以兒茶素的消耗量和茶黃素的生成量為評價指標,結合反應前后體系對紫外可見光的吸收變化及HPLC/MS的分子量信息,確定以下酶促低聚反應體系:溫度20℃,反應底物50mg,緩沖液(pH=5.0的磷酸緩沖液與丙酮按體積比為1:10)11ml,辣根過氧化物酶0.8mg,H2O2(3%v/v)0.3ml,磁力攪拌轉速為700

2、rpm,反應1h,pH=1.87的檸檬酸2ml終止反應。篩選8組反應底物采用此酶促低聚體系進行反應,除生成結構已經明確的茶黃素類衍生物,底物還聚合或分解產生分子量在200~1200之間、聚合度在五以內的低聚合物,其理化性質及結構有待進一步鑒定。 對紅茶乙酸乙酯提取物進行分離純化及活性研究。結果發(fā)現(xiàn),結合柱層析、分析型HPLC及制備型HPLC可對大吉嶺紅茶酯層提取物進行有效地分離分析,得到7個峰組分,并從峰3中分離出兩種黃酮甙的混

3、合物,HPLC/MS及NMR確認為槲皮素-3-βD-葡萄糖甙及槲皮素-3-β-D-半乳糖甙;采用表沒食子兒茶素沒食子酸酯(EGCG)、茶多酚(TP)、茶黃素(TF)、茶黃素單沒食子酸酯(TFMG)、茶黃素雙沒食子酸酯(TFDG)作為對照,對紅茶酯提取物的分離組分進行總抗氧化、清除OH·、O2-·、和DPPH·活性試驗,并采用SAS軟件進行差異顯著性比較。結果表明,紅茶提取物中兒茶素單體和低聚物的活性要高于高聚物,從而為篩選高活性紅茶組分

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