蛋白質溶液的膜結晶.pdf_第1頁
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文檔簡介

1、膜蒸餾與結晶技術的耦合過程-膜結晶,作為一種新型的分離技術適應時代的需要應運而生。其基本的原理是通過膜蒸餾來脫除溶液中的水,濃縮溶液,使溶液達到過飽和并通過膜表面的誘導作用而形成晶體。與常規(guī)結晶技術相比,膜結晶具有過程可控、結晶誘導時間短、初始蛋白濃度低、成核難度低等優(yōu)點。用膜結晶技術結晶蛋白質溶液可得到適合X-射線衍射分析的大分子蛋白質晶體,從而有利于了解蛋白質的生物活性或設計在病理學中有特殊靶點的新型藥物,這對蛋白質與酶的科學研究有

2、著重要的意義。本文用膜結晶技術對溶菌酶和卵清蛋白的結晶條件進行了實驗研究。主要工作如下:
   1、在溶菌酶溶液膜結晶的實驗研究過程中,在用靜態(tài)膜結晶法考察結晶劑種類對溶菌酶膜結晶影響的基礎上,用動態(tài)膜結晶法考察了結晶劑濃度、洗脫劑濃度、溶菌酶濃度、pH值、溫度、洗脫液流速、添加劑種類及PEG類化合物作為添加劑對溶菌酶晶形和膜通量的影響,對結晶條件進行了優(yōu)化,得到了質量較高的溶菌酶晶體。結果表明,溶菌酶濃度在20~30mg/mL

3、、結晶劑NaCl濃度在4%~9%、洗脫劑MgCl2濃度在16%~25%、pH值在4.7~8.2、溫度在15℃左右、洗脫劑的流速為0.521mL/min的條件下能夠得到高質量的溶菌酶晶體,以NaCl作為結晶劑,加入PEG類化合物或酒石酸鈉鉀作為添加劑能夠有效改善晶體的形狀及大??;
   2、在卵清蛋白溶液膜結晶的實驗研究過程中,用靜態(tài)膜結晶法初步探索了不同溶劑、不同pH值、不同結晶劑種類及濃度、不同洗脫液濃度對卵清蛋白溶液膜結晶的

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