1、南京醫(yī)科大學碩士學位論文DNMT1基因shRNA干擾重組體介導的人乳腺癌細胞的增殖抑制作用的研究姓名：魏欽俊申請學位級別：碩士專業(yè)：生物化學與分子生物學指導教師：曹新20080428南京醫(yī)科大學碩士學位論文DMMrZ基因shRNA干擾重組體介導的人乳腺癌細胞的增殖抑制作用的研究中文摘要表型遺傳修飾(epigenesis)是誘導腫瘤發(fā)生、發(fā)展一個重要的分子遺傳學途徑，其中DNA甲基化是最常見的哺乳細胞表型遺傳修飾方式。DNA的異常甲基化主

2、要iS_過DNA甲基化轉移酶(DNAmethyltransferase，DNMT)來實現。DNMT按照酶功能的不同可分為從頭產生DNA甲基化的酶(DNMT3a和DNMT3b)和維持烈妊甲基化的酶(DNMTl)，其中D】心假1在基因組DNA甲基化維護中有著舉足輕重的作用。目前認為正確維持DNA甲基化狀態(tài)是正常生長發(fā)育過程中所必需的，許多腫瘤的發(fā)生與甲基化狀態(tài)的異常密切相關。本研究擬通過鼢愴干擾(RNAinterference，RNAi)技

3、術I&mRNA水平來抑制DNMTl基因的表達，使乳腺癌細胞中研心仃1活性下調或抑制，解除乳腺癌發(fā)生相關基因啟動子區(qū)的高度甲基化，從而抑制乳腺癌細胞的異常增殖或逆轉乳腺細胞的惡性轉變，為探索乳腺癌的臨床分子治療奠定重要的理論和實驗基礎。目的：利用RNAi技術，構建靶向DNMTl基因的短發(fā)夾RNA(shorthairpinRNA，shRNA)重組質粒，將重組質粒轉染到人乳腺癌MCF7細胞中，觀察其在乳腺癌MCF7細胞中抑制DNMTI基因的表