1、鹽脅迫在農業(yè)領域是一種主要的非生物脅迫，20％以上的陸地和近乎一半的灌溉土地都受到鹽分影響，尋找與抗鹽脅迫相關蛋白或基因對了解植物耐鹽機制以及提高植物抗鹽性十分重要。
　　甜菜是甜土植物，且抗鹽能力較強;甜菜M14品系是一種特殊品種，它由栽培甜菜（Beta vulgarisL.）和野生甜菜（Beta corolliflora Zoss.）雜交產(chǎn)生，它有耐旱、耐寒、耐鹽等抗逆性，成為挖掘野生甜菜優(yōu)質基因和蛋白極其難得的材料。

2、　　蛋白質磷酸化在調控細胞生命活動中起著很重要的作用，通常這種翻譯后修飾會參與到植物響應生物脅迫和非生物脅迫的過程。蛋白質磷酸化通過蛋白激酶引入磷酸根基團到蛋白質來改變蛋白質的構象進而調控蛋白質的活性。本實驗采用了定量蛋白質組學的方法研究甜菜M14品系響應鹽脅迫定量磷酸化蛋白質的變化，進一步研究甜菜M14品系響應鹽脅迫的防御機制。
　　為了研究結果更加完整準確，我們同時從雙向電泳和溶液內酶解兩個方法獲得差異磷酸化蛋白質，一方面采用

3、Pro-Q Diamond熒光染色結合雙向凝膠電泳技術來分離甜菜M14品系葉片對照組和NaCl處理組（200mM，400mM）磷酸化蛋白質，結果表明，與對照組相比，200mM NaCl處理有24個差異的磷酸化蛋白質，有16個得到成功鑒定，其中有8個磷酸化蛋白質上調表達。與對照組相比，400mMNaCl處理有36個差異的磷酸化蛋白質，有28個得到成功鑒定，其中17個磷酸化蛋白質上調表達。另一方面將對照組和NaCl處理組(200mM，400

4、mM)的蛋白質樣品進行溶液內酶解，除鹽，富集，經(jīng)處理后的磷酸化肽段采用LC-MS/MS進行質譜鑒定，鑒定出189個差異的磷酸化蛋白質，94個磷酸化蛋白質上調表達，95個磷酸化蛋白質下調表達。根據(jù)BLAST注釋信息以及Uniprot中信息及相關文獻，將以上獲得鹽應答差異磷酸化蛋白進行功能分類，鑒定出的差異表達磷酸化蛋白質參與信號轉導和蛋白激酶(14％)、運輸(15％)、代謝(16％)、光合作用(2％)、蛋白折疊和降解(3％)、脅迫和防御(

5、8％)、蛋白合成(7％)、轉錄(13％)、細胞結構(12％)生物過程中。結合上述蛋白質的功能分析繪制了甜菜M14品系響應鹽脅迫磷酸化蛋白質調控的代謝圖譜。結果表明，信號轉導和蛋白激酶、代謝和轉錄相關磷酸化蛋白占較大比例。
　　為了進一步研究信號轉導途徑對甜菜M14品系的耐鹽機制的影響，將上述獲得的參與信號轉導途徑的15個磷酸化蛋白質編碼基因進行了RT-PCR驗證，結果表明參與植物信號轉導途徑中的磷酸化蛋白能夠感知鹽脅迫信號，傳遞信