1、目的：過去一直認為許多腫瘤的形成主要是基因突變引起的，但20年后只發(fā)現癌基因K-ras和抑癌基因p53在許多不同類型的腫瘤中存在較高頻率的突變?，F在已發(fā)現越來越多基因的失活可能與甲基化有關。DNA甲基化能夠抑制多種惡性血液病抑癌基因的表達，是惡性血液病發(fā)病的機制之一，并與預后密切相關。當抑癌基因正常時起抑制細胞增殖和腫瘤發(fā)生、轉移的作用，參與細胞粘附與信號傳導以及DNA損傷的修復等。如果抑癌基因突變或缺失失去活性，其功能削弱，細胞就會在

2、無控制狀態(tài)下反復復制，最終形成腫瘤并發(fā)生轉移。近年來，新的抑癌基因不斷被發(fā)現，SHP-1酪氨酸磷酸酶是其中之一，它在造血細胞信號傳導中發(fā)揮負調節(jié)作用，SHP-1表達的減少和缺失對腫瘤的發(fā)生起關鍵性作用。以往的研究證明啟動子區(qū)的高甲基化導致抑癌基因失活是人類腫瘤所具有的共同特征之一，而且這種高甲基化是導致抑癌基因失活的又一個機制。與基因改變不同，遺傳外改變是可逆的?；謴蛦幼蛹谆鹗Щ铌P鍵基因的表達有助于逆轉腫瘤細胞的表型。目前去甲

3、基化治療已成為一種誘導分化和抑制增殖的新方法，對AML、MDS、CML療效肯定。本研究旨在探討SHP-1基因在急性白血病患者中的表達情況及其與預后的關系。同時進一步了解甲基化抑制劑對白血病細胞中SHP-1表達的影響及SHP-1在白血病發(fā)病機制中的作用。為臨床上DNA甲基化在腫瘤早期診斷和預后分析中以及在腫瘤的預防和治療中可能具有的重要作用。 方法：本研究對象為75例急性白血病(AL)患者。初治患者49例，復發(fā)患者5例，緩解患者2

4、1例(其中追蹤觀察8例從初治到緩解的患者)。急性髓細胞白血病(AML)患者55例[M12例、M211例、M318例、M45例、M516例、M62例、骨髓增生異常綜合征(MDS)轉白1例]。急性淋巴細胞白血病(ALL)患者20例。骨髓增殖性疾病7例(MDS3例、真性紅細胞增多癥2例、原發(fā)性血小板增多癥2例)，慢性粒細胞白血病(CML)14例(包括10例慢性粒細胞白血病慢性期患者、4例慢性粒細胞白血病急變期患者)，23例正常人作為正常對照。

5、采用半定量逆轉錄-聚合酶鏈反應(RT-PCR)方法對AL患者、CML、MPD患者和23例正常對照的骨髓進行SHP-1、SOCS3mRNA水平的監(jiān)測。通過細胞培養(yǎng)的方法對白血病細胞株K562、和淋巴瘤細胞株T2進行傳代培養(yǎng)，并用不同濃度的甲基化抑制劑5雜氮-2脫氧-胞苷(5-aza-2’deoxycytidine，5-aza-CdR)和三氧化二砷(As2O3)對其進行處理，用MTT法觀察細胞活性及生長狀況，并繪制生長曲線；同時用RT-PC

6、R方法檢測實驗組與對照組SHP-1、c-kit基因的mRNA的表達水平。 結論： 1.SHP-1在初治AL患者低表達，緩解后表達升高，復發(fā)后再次降低。考慮SHP-1的甲基化與它的低表達和缺失密切相關。SHP-1低表達的初治AL患者緩解率低，表明與白血病的療效預后有關，可用來作為判斷療效預后的指標。而SOCS3陽性組的緩解率高于陰性組，但無統計學意義。 2.5-aza-CdR和As2O3可增加K562和T2細胞株中