1、目的:動態(tài)觀察細胞周期素依賴性激酶5(Cdk5)及其活性調(diào)節(jié)亞基p35的mRNA和蛋白在戊四氮(PTZ)點燃模型大鼠海馬CAl、CA3區(qū)及齒狀回顆粒細胞層和門區(qū)的表達變化，結(jié)合苔蘚纖維出芽的動態(tài)變化，探討其在癲癇發(fā)生中的作用。 方法:清潔級SD雄性成年大鼠120只，隨機分為生理鹽水對照組和戊四氮組，戊四氮組連續(xù)腹腔注射PTZ 30mg／kg每天一次，對照組同時注射等體積生理鹽水。按戊四氮第一次給藥后3天、1周、2周、4周和6周在

2、兩組內(nèi)各隨機分為5個亞組。每個亞組再按實驗方法分為兩個小組：一組用于免疫組化和原位雜交，檢測各時間點Cdk5／p35蛋白和mRNA在海馬CAl、CA3區(qū)、齒狀回顆粒細胞層和門區(qū)的表達；另一組用于Timm染色，檢測苔蘚纖維出芽情況，每個小組各6只。 結(jié)果: 1．動物模型 大鼠多在連續(xù)注射PTZ 22~27天后被點燃，平均25.2±1.5天。模型點燃率為95.8％，死亡率為4.2％。達到點燃標準的大鼠，可見自發(fā)發(fā)作及

3、腦電圖癇性波，再次予相同閾下劑量PTZ刺激仍可誘發(fā)癇性發(fā)作和腦電圖癇性波；對照組未出現(xiàn)誘發(fā)發(fā)作及自發(fā)發(fā)作，腦電圖亦無癇性波。 2．苔蘚纖維出芽的動態(tài)變化 與對照組相比，戊四氮組各時間點CA3區(qū)苔蘚纖維出芽評分均有顯著性差異。從3天起評分逐漸增加，2周時達高峰并維持至6周。齒狀回顆粒細胞上區(qū)苔蘚纖維出芽評分為O～1分，各時間點之間及與對照組之間比較均無顯著性差異。生理鹽水對照組苔蘚纖維出芽評分僅O～1分，各時間點間無顯著性

4、差異。 3．Cdk5／p35的動態(tài)表達 Cdk5／p35主要表達在海馬CAl、CA3區(qū)的錐體細胞、齒狀回顆粒細胞和門區(qū)神經(jīng)元中。戊四氮組大鼠上述各區(qū)c~5／p35 mRNA在3天時表達即有明顯上調(diào)，4周內(nèi)仍維持在較高水平，6周時基本恢復到對照組水平；各區(qū)Cdk5／p35蛋白表達從3天起即上調(diào)，逐漸增高，2周時最強，其后下調(diào)，至6周時接近或達到對照組水平。 4．Cdk5細胞內(nèi)分布的變化 對照組Cdk5 mR