1、目的:喉癌是耳鼻咽喉一頭頸外科常見的惡性腫瘤之一。喉癌的發(fā)生、發(fā)展與其它惡性腫瘤一樣,可能與多因素引起相關基因表達水平的改變有關。伴有kazal域的富含半胱氨酸的逆轉誘導蛋白(RECK)是一種新型基質金屬蛋白酶(MMP)抑制劑和腫瘤抑制基因,可在轉錄后水平抑制多種MMP的表達,對抑制腫瘤的侵襲、生長、轉移和血管生成有重要意義。編碼第二人表皮生長因子受體癌基因(HER-2/neu),在細胞信號轉導中發(fā)揮重要作用,調節(jié)細胞的生長、分化,可誘

2、導RECK的下調來促進腫瘤細胞的生長、侵襲等。血管內皮生長因子(VEGF)是誘導腫瘤血管發(fā)生的重要調節(jié)因素,RECK對腫瘤血管的形成及腫瘤細胞生物學行為均有重要影響。本課題通過研究RECK、HER-2/neu和VEGF在喉癌組織的表達情況及其意義,從而探討其與喉癌發(fā)生發(fā)展的關系。
　　 方法:
　　 1應用免疫組織化學(immunohistochemistry,IHC)S-P法檢測40例喉癌組織、30例癌旁組織和14例正

3、常喉粘膜組織中RECK、HER-2/neu和VEGF的表達情況。
　　 2應用流式細胞術(Flow Cytometrye,FCM)的方法定量檢測40例喉癌組織、30例癌旁組織和14例正常喉粘膜組織中RECK、HER-2/neu和VEGF的蛋白含量。
　　 3運用統(tǒng)計軟件SPSS13.0對數(shù)據(jù)進行統(tǒng)計分析。以P≤0.05為差異在統(tǒng)計學上有顯著性意義,P≤0.01為差異在統(tǒng)計學上有非常顯著性意義。
　　 結果:

4、>　　 1 RECK的表達
　　 1.1免疫組化法:應用S-P法檢測喉癌組織、癌旁組織及正常喉粘膜組織中RECK的表達強度呈上升趨勢,三組相比有顯著性差異(P＜0.01)。進一步兩兩比較,喉癌組RECK的表達低于癌旁組與正常喉粘膜組(P＜0.01,P＜0.01),而癌旁組與正常喉粘膜組相比無顯著性差異(P＞0.05)。在喉癌組織中,RECK的表達與淋巴結轉移(P＜0.01)、臨床分期(P＜0.01)及病理分級(P＜0.05)有

5、關;與臨床分型、腫瘤大小、吸煙量、年齡和性別無關(P＞0.05)。
　　 1.2流式細胞術:檢測RECK在喉癌組織、癌旁組織及正常喉粘膜組織中的表達量(FI值)分別為0.8682±0.2935、1.0472±0.1756、1.1550±0.1714,三組相比有顯著性差異(P＜0.01)。喉癌組織中RECK的表達量明顯低于癌旁組織(P＜0.01)及正常喉粘膜組織(P＜0.01),而癌旁組織與正常喉粘膜組織相比無顯著性差異(P＞0.

6、05)。在喉癌組織中,RECK的表達與淋巴結轉移(P＜0.01)、臨床分期(P＜0.01)及病理分級(P＜0.05)有關。
　　 2 HER-2/neu的表達
　　 2.1免疫組化法:應用S-P法檢測喉癌組織、癌旁組織及正常喉粘膜組織中HER-2/neu的表達強度呈下降趨勢,三組相比有顯著性差異(P＜0.01)。進一步兩兩比較,喉癌組HER-2/neu的表達均高于癌旁組與正常喉粘膜組(P＜0.01,P＜0.01),而癌旁

7、組與正常喉粘膜組相比無顯著性差異(P＞0.05)。在喉癌組織中,HER-2/neu的表達與淋巴結轉移(P＜0.05)、臨床分期(P＜0.01)及病理分級(P＜0.01)有關;與臨床分型、腫瘤大小、吸煙量、年齡和性別無關(P＞0.05)。
　　 2.2流式細胞術:檢測HER-2/neu在喉癌組織、癌旁組織及正常喉粘膜組織中的表達量(FI值)分別為1.5429±0.3812、1.1213±0.2432、1.0379±0.1760,三

8、組相比有顯著性差異(P＜0.01)。喉癌組織中HER-2/neu的表達量明顯高于癌旁組織(P＜0.01)及正常喉粘膜組織(P＜0.01),而癌旁組織與正常喉粘膜組織相比無顯著性差異(P＞0.05)。在喉癌組織中,HER-2/neu的表達與淋巴結轉移(P＜0.05)、臨床分期(P＜0.01)及病理分級(P＜0.01)有關。
　　 3 VEGF的表達
　　 3.1免疫組化法:應用S-P法檢測喉癌組織、癌旁組織及正常喉粘膜組織

9、中VEGF的表達強度呈下降趨勢,三組相比有顯著性差異(P＜0.01)。進一步兩兩比較,喉癌組VEGF的表達均高于癌旁組與正常喉粘膜組(P＜0.01,P＜0.05),而癌旁組與正常喉粘膜組相比無顯著性差異(P＞0.05)。在喉癌組織中,VEGF的表達與淋巴結轉移(P＜0.05)、臨床分期(P＜0.01)及病理分級(P＜0.01)有關;與臨床分型、腫瘤大小、吸煙量、年齡和性別無關(P＞0.05)。
　　 3.2流式細胞術:檢測VEG

10、F在喉癌組織、癌旁組織及正常喉粘膜組織中的表達量(FI值)分別為2.1948±0.6070、1.2663±0.5910、1.0336±0.2813,三組相比有顯著性差異(P＜0.01)。喉癌組織中VEGF的表達量明顯高于癌旁組織(P＜0.01)及正常喉粘膜組織(P＜0.05),而癌旁組織與正常喉粘膜組織相比無顯著性差異(P＞0.05)。在喉癌組織中,VEGF的表達與淋巴結轉移(P＜0.05)、臨床分期(P＜0.01)及病理分級(P＜0.

11、01)有關。
　　 4喉癌組織中RECK蛋白表達量(FI值)與HER-2/neu蛋白表達量(FI值)呈直線負相關,直線回歸方程Y=2.053-0.581X(r=-0.752,P=0.000)。
　　 5喉癌組織中RECK蛋白表達量(FI值)與VEGF蛋白表達量(FI值)呈直線負相關,直線回歸方程Y=2.656-0.528X(r=-0.805,P=0.000)。
　　 6喉癌組織中HER-2/neu蛋白表達量(FI

12、值)與VEGF蛋白表達量(FI值)呈直線正相關,直線回歸方程Y=1.301+0.563X(r=0.610,P=0.000)。
　　 結論:
　　 1 RECK、HER-2/neu和VEGF在喉癌組織、癌旁組織及正常喉粘膜組織中均有表達。
　　 2 RECK在喉癌組織中的定量及定性表達均明顯低于癌旁組織及正常喉粘膜組織,可能與喉癌的發(fā)生有關。
　　 3 HER-2/neu和VEGF在喉癌組織中的定量及定性表

13、達均明顯高于癌旁組織及正常喉粘膜組織,可能與喉癌的發(fā)生有關。
　　 4 RECK、HER-2/neu和VEGF在喉癌組織中的表達與淋巴結轉移、臨床分期、病理分級有相關性;與臨床分型、腫瘤大小、吸煙量、年齡和性別無關。提示其可能與喉癌的發(fā)展及轉移有關。
　　 5 RECK與HER-2/neu、VEGF在喉癌組織中的表達均有關,且隨HER-2/neu和VEGF表達增高而減少,并均呈直線負相關。
　　 6 HER-2/