1、[研究目的]腦外傷是青年人的主要死亡和致殘原因，它可以觸發(fā)包括氧化應(yīng)激和炎癥在內(nèi)的一系列級聯(lián)反應(yīng)，從而導(dǎo)致繼發(fā)性腦損傷和長期神經(jīng)功能障礙，然而目前臨床上尚無有效的治療方法能夠減輕患者的神經(jīng)功能障礙，降低殘疾的發(fā)生率。越來越多的研究提示，抗氧化劑丙酮酸乙酯對急性腦損傷具有神經(jīng)保護作用，機制尚未完全闡明。本研究將在大鼠腦外傷模型中研究丙酮酸乙酯的長期神經(jīng)保護作用及其可能的作用機制。
　　[研究方法]將成年SD大鼠隨機分為假手術(shù)組、對照

2、組和丙酮酸乙酯處理組，進行單側(cè)大腦皮層挫傷手術(shù)。首先，我們建立大鼠腦外傷模型，并通過一系列行為學(xué)測試（包括錯步試驗、Morris水迷宮）和焦油紫染色損傷體積分析來確定丙酮酸乙酯的有效劑量和治療時間窗。隨后，我們在腦外傷后48小時向大鼠股靜脈內(nèi)注射evans blue活性染料以確認血腦屏障完整性的破壞程度;通過透射電鏡來觀察各組大鼠血腦屏障超微結(jié)構(gòu)的變化;并采用免疫組化、明膠酶譜、western blots和實時定量real-time P

3、CR等方法來評估各組大鼠小膠質(zhì)細胞的激活情況和多種炎癥介質(zhì)的mRNA水平，以及基質(zhì)金屬蛋白酶（MMP-9和MMP-2）的蛋白表達和活性改變。最后，我們通過免疫組化和透射電鏡在體觀察腦外傷后大鼠軸突、髓鞘和少突膠質(zhì)細胞祖細胞的形態(tài)分布和數(shù)量改變，并在體外進行大鼠原代少突膠質(zhì)細胞祖細胞培養(yǎng)，以進一步探索丙酮酸乙酯對少突膠質(zhì)細胞祖細胞的保護機制。
　　[結(jié)果]我們成功建立了大鼠腦外傷模型，發(fā)現(xiàn)在腦外傷后即刻、12、24、36、48、60

4、小時，分別向大鼠腹腔內(nèi)注射丙酮酸乙酯30mg/kg可以觀察到顯著的神經(jīng)保護作用，即促進腦外傷后28天大鼠的感覺運動功能和空間學(xué)習(xí)記憶能力的恢復(fù)，并能有效減少組織損傷體積。我們發(fā)現(xiàn)丙酮酸乙酯可以減少腦外傷后大鼠血腦屏障的滲漏，抑制小膠質(zhì)細胞的過度激活，降低多種炎癥介質(zhì)(TNF-α，IL-1α，IL-1β，COX-2和iNOS)的mRNA水平，并減少外傷誘導(dǎo)的MMP-9和MMP-2的蛋白表達和活性上調(diào)。最后，我們通過在體和離體研究發(fā)現(xiàn)丙酮酸