1、鐵皮石斛經(jīng)醇提、水提、醇沉處理,獲得醇提物、水提物、水提醇溶物、水提醇沉物、未透析總多糖和透析后粗多糖(DOP),DOP經(jīng) DEAE-Cellulose陰離子交換層析分離得水洗糖DOP-W(92.18％)和鹽洗糖DOP-S(3.07%),對(duì)DOP-W進(jìn)行40%、60%和80%分級(jí)醇沉得到 DOP-W1(5.56%)、DOP-W2(32.65%)和DOP-W3(43.70%)三種組分,DOP-W3再經(jīng)Sephadex G-100凝膠柱純化

2、獲三種多糖組分DOP-W3-a(11.31%)、DOP-W3-b(17.27%)和DOP-W3-c(37.39%)。通過(guò)對(duì)上述組分進(jìn)行體外腸黏膜免疫活性評(píng)價(jià),篩選高活性組分DOP-W3-b。
　　小鼠口服 DOP-W3-b的免疫活性實(shí)驗(yàn)表明,DOP-W3-b可改善腸粘膜形態(tài)結(jié)構(gòu),并通過(guò)Peyer’s結(jié)和MLN中免疫細(xì)胞刺激淋巴細(xì)胞因子的分泌、促進(jìn)腸黏膜固有層漿細(xì)胞SIgA的合成,從而實(shí)現(xiàn)對(duì)腸黏膜系統(tǒng)免疫活性的調(diào)節(jié)。
　　運(yùn)用

3、HPLC、GC、GC-MS和NMR等分析技術(shù)對(duì)DOP-W3-b的結(jié)構(gòu)特征進(jìn)行解析表明,DOP-W3-b是相對(duì)分子質(zhì)量為1.543×104 Da的均一組分,由甘露糖和葡萄糖按4.50:1.00摩爾比組成,其主鏈主要由β-(1→4)-D-Manp、β-(1→4)-D-Glcp和β-(1→3,6)-D-Manp重復(fù)構(gòu)成,支鏈由β-(1→4)-D-Manp、β-(1→4)-D-Glcp和β-1-D-Glcp連接組成,其中β-(1→4)-D-Ma