1、鉤端螺旋體病（簡稱鉤體?。┦怯芍虏⌒糟^端螺旋體（簡稱鉤體）引起的人獸共患性傳染病。鉤體病的病理形態(tài)學特點為肝、腎、肺等多臟器的彌漫性出血和輕度炎癥反應，但出血和炎癥反應輕微的機制均未闡明。 本課題通過體內(nèi)和體外實驗比較不同毒力鉤體引起的病理改變和細胞因子表達的差異。在豚鼠腹腔內(nèi)分別注射致病性問號鉤體黃疸出血群賴型有毒株Lai株，賴型無毒株IPAV株，以及非致病性雙曲鉤體三寶壟群Patoc型Patoc 1株，觀察豚鼠各臟器的病理改

2、變；EnVision二步法檢測鉤體抗原在豚鼠組織中的分布；用PCR法檢測鉤體16S rDNA片段在豚鼠血液和組織中的分布；應用Real-time RT-PCR法檢測豚鼠血液中細胞因子IFN-γ、TNF-α、IL-12、MCP-1 mRNA表達的變化。結果發(fā)現(xiàn)在豚鼠體內(nèi)IPAV株和Patoc 1株不能引起豚鼠組織病變，也未在豚鼠的血液和組織中檢測出鉤體的存在；Lai株可以引起豚鼠典型的鉤體病病變，并可以在豚鼠血液和組織中檢測到鉤體的存在和

3、分布。三株鉤體在感染早期皆能引起豚鼠血液中細胞因子表達的升高，在感染24小時后 IFN-γ、TNF-α、IL-12、MCP-1 mRNA表達升高倍數(shù)在Patoc 1株感染組中分別為8.7、27.2、15、4.8，在IPAV株感染組中為8.9、10.8、3.8、8.4，在Lai株組中為4.5、3.7、1.6、2.9。但與Patoc 1株和IPAV株感染組相比，Lai株引起豚鼠血液中細胞因子表達升高的水平較低，差異有統(tǒng)計意義（p<0.05）

4、。 在體外三株鉤體分別與人單核巨噬細胞THP-1相互作用，應用Real-time RT-PCR法檢測TLR2、TLR4、iNOS基因表達的變化，通過Real-time RT-PCR和ELISA法檢測細胞因子IFN-γ、TNF-α、IL-12、MCP-1的表達的改變。結果顯示Patoc 1株可以引起巨噬細胞TLR2、TLR4和iNOS基因表達上調(diào)，而IPAV株和Lai株主要引起TLR4和iNOS基因表達升高，但IPAV株誘導能力更