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文檔簡介
1、目的:探討PI3K/Akt特異性抑制劑LY294002與奈達鉑(NDP)單獨及聯(lián)合應(yīng)用對宮頸癌HeLa細胞體外生長的影響以及LY294002對NDP的增敏作用,并初步探討其可能作用機制,
方法:(1)采用溴化四甲基偶氮唑藍(MTT)法測定不同濃度的LY294002與NDP單獨或聯(lián)合應(yīng)用對體外宮頸癌HeLa細胞的增殖抑制率。(2)Western blot免疫印跡法檢測LY294002、NDP單獨或聯(lián)合應(yīng)用對體外宮頸癌HeLa細胞
2、Bcl-2、Caspase-3、PI3K、磷酸化PI3K(p-PI3K)、Akt和磷酸化Akt(p-Akt)蛋白的表達和活性的影響。
結(jié)果:(1)LY294002、NDP均能抑制宮頸癌 HeLa細胞生長,隨著藥物濃度的增加,細胞抑制率明顯增加,P<0.05,差異具有統(tǒng)計學意義。每個藥物濃度隨著作用時間的延長,細胞抑制率逐漸增加,P<0.05,差異具有統(tǒng)計學意義。(2) LY294002可以增強HeLa細胞對NDP的敏感性。LY
3、294002、NDP單藥應(yīng)用的細胞抑制率明顯低于LY294002與NDP聯(lián)合用藥的抑制率,P<0.05,差異具有統(tǒng)計學意義。運用公式計算聯(lián)合指數(shù),提示聯(lián)合作用時,具有協(xié)同性。(3)Western Blot法分析結(jié)果表明:LY294002、NDP均能下調(diào)HeLa細胞Bcl-2蛋白表達,同時上調(diào)Caspase-3蛋白表達。且與LY294002、NDP單藥應(yīng)用比較,LY294002與NDP聯(lián)合應(yīng)用Bcl-2蛋白的表達率有顯著降低,而Caspa
4、se-3蛋白表達率顯著增高。(4)PI3K、Akt蛋白在宮頸癌HeLa細胞內(nèi)均有表達,LY294002作用后能明顯抑制HeLa細胞內(nèi)p-PI3K、p-AKT的蛋白表達。
結(jié)論:
?。?)PI3K特異性抑制劑LY294002及NDP均明顯抑制宮頸癌HeLa細胞的體外增殖,且這種作用呈濃度及時間依賴性。
(2)隨著LY294002濃度的增加,HeLa細胞對NDP的敏感性逐漸增強,提示LY294002對NDP具有協(xié)
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