1、華東師范大學碩士學位論文DNA電化學活性非活性轉(zhuǎn)換分子信標的制備及其應用研究姓名：張帆申請學位級別：碩士專業(yè)：分析化學指導教師：程圭芳何品剛20080501摘要著介紹了分子信標技術，從熒光分子信標和電化學分子信標兩個方面，分別對近年來分子信標檢測目標分子的原理、方法、應用及發(fā)展趨勢等方面做了綜述；并對納米金顆粒的特性及在生物分析中的應用作了簡介。最后闡述了本論文的目的意義及創(chuàng)新之處。第二章：新型電化學活性非活性轉(zhuǎn)換分子信標的研制及其應用

2、本章中，首先提出了一種基于電化學活性非活性分子轉(zhuǎn)換的新型分子信標。此類分子信標本身在實驗選定條件下無電化學信號，與完全互補序列雜交后產(chǎn)生電化學信號，論文采用碳納米管修飾電極對雜交前后的電化學信號進行檢測。實驗發(fā)現(xiàn)該分子信標的電化學信號強度與完全互補序列的濃度在(60x10一mol／L14x10。6mol／L)范圍內(nèi)成線性關系，相關系數(shù)為09972，檢出限為lxl0嗡mol／L；其中，完全非互補序列的電化學響應信號與空白信號基本相同，且對

3、一、二、三堿基錯配序列的響應信號與完全互補序列的響應信號差別明顯，表明分子信標可以實現(xiàn)對目標DNA的定量檢測和在一定程度上鑒別堿基錯配。第三章：基于納米金顆粒的高特異性DNA電化學活性非活性轉(zhuǎn)換分子信標體系的研制及其應用本章通過檸檬酸三鈉還原氯金酸的方法制備納米金顆粒，利用其與單鏈DNA和雙鏈DNA的不同相互作用，構建高特異性的DNA電化學分子信標。實驗發(fā)現(xiàn)，完全非互補序列的電化學響應信號與空白信號基本相同，完全互補序列與一、二、三堿基

4、錯配序列電化學響應差別明顯，且單堿基錯配序列的電化學響應信號僅為完全互補序列的10％左右，與以往的方法相比，二者的電信號差別明顯擴大。這說明納米金顆粒與單鏈DNA和雙鏈DNA的不同相互作用大大提高了雜交反應的特異性，完全有可能實現(xiàn)對單堿基突變基因片段的檢測，為臨床醫(yī)學診斷提供了一種行之有效的突變基因檢測方法。第四章：納米金顆粒增強DNA電化學活性非活性轉(zhuǎn)換分子信標特異性的作用機理研究本章運用電化學方法對納米金顆粒提高DNA檢測特異性的機