1、大豆在生長發(fā)育過程中經常受到病毒的影響，病毒病不僅影響產量，而且能使籽粒發(fā)病形成褐斑，品質下降，影響出口外銷。植物中存在一類抗病基因——R基因(Resistance gene)，國內外研究表明R基因能與病毒產物直接或間接互作，識別病原體從而產生反應信號，啟動植物體內的防衛(wèi)機制。利用基因工程技術將抗病基因轉入大豆，是培育廣譜、持久抗病大豆品種的育種新策略。
　　KR3基因是大豆6號染色體上的一段NBS-LRR-TIR類抗病基因，具有

2、p-loop(GGVGKTT)、Kinase-2a(VLDD)、Kinase-3a（GS/TR）、疏水結構域(HD，GLPLAL)等抗病基因保守結構的氨基酸編碼序列。進一步的二級結構分析表明，KR3蛋白卷曲結構為37.9％，螺旋結構為49.3％，折疊結構為12.7％，其中卷曲結構可能與抗病基因NBS結構域的抗病識別有關，而螺旋結構則可能與LRR結構域的存在有關。系統(tǒng)發(fā)育樹分析結果表明，KR3基因與煙草N基因親緣關系較近，同源性對比為37

3、％，因而可能是大豆中具有功能類似N基因的一類抗病基因。RT-PCR結果表明KR3基因本身表達量較低，但在外源水楊酸處理60h后達到最大值，隨后又逐漸下降。
　　本研究從基因芯片中克隆到KR3基因片段，并將該片段以Gateway克隆的方式構建成植物表達載體，采用本實驗室前期建立的農桿菌介導子葉節(jié)轉化體系將抗性基因KR3導入受體天隆一號中，共轉化386個外植體，獲得轉基因生根苗15株，經草丁膦涂抹、Bar試紙條和PCR鑒定，最終獲得1