1、微小分子RNA（miRNAs）通過序列反向互補方式與其作用靶基因結合，在轉錄后和翻譯水平上對其作用靶基因進行調控。本項研究以38個小麥miRNAs為基礎，較系統(tǒng)地研究了供試小麥miRNAs(TaMIRs)在豐、缺氮和干旱條件下的表達特征，鑒定了對低氮和干旱逆境應答的TaMIRs及其可能作用的靶基因。采用DNA重組和基因遺傳轉化技術，建立了應答低氮TaMIR1129的正、反義表達轉基因煙草植株，對其介導植株抵御低氮脅迫的能力進行了驗證。此

2、外，構建了對低氮應答的TaMIR1118可能作用靶基因鈣調素TaCaM2-2和TaCaM2-3雙元表達載體，建立了遺傳轉化上述靶基因的轉基因煙草植株。主要研究結果如下。
　　1.供試38個TaMIRs中，有7個成員(TaMIR156、TaMIR399、TaMIR444、TaMIR1118、TaMIR1129、TaMIR1133和TaMIR1136)對低氮逆境產(chǎn)生明顯應答，TaMIR399和TaMIR1133呈下調表達，其他成員呈上

3、調表達;有7個成員(TaMIR156、TaMIR408、TaMIR1119、TaMIR1129、TaMIR1133、TaMIR1136和TaMIR1139)對干旱逆境明顯應答，TaMIR1136呈上調表達，其他成員呈下調表達。
　　2.對低氮和干旱逆境呈明顯應答的TaMIRs具有數(shù)目不等的可能作用靶基因。上述靶基因在生物學功能上歸屬于信號轉導、轉錄調控、RNA代謝、初生代謝、次生代謝、運輸、發(fā)育和防御反應等類別。
　　3.采

4、用RT-PCR技術克隆了對低氮逆境呈明顯應答的TaMIR1129初始序列，采用DNA重組技術，構建了正、反義表達TaMIR1129的雙元表達載體，利用農桿菌介導的遺傳轉化技術，建立了上、下調表達TaMIR1129的轉基因煙草植株。
　　4.以典型上、下調表達TaMIR1129的轉基因煙草株系和野生型(CK)植株為材料，對該TaMIR介導植株應答外界氮素供應的特征進行了研究。結果表明，豐氮條件下，上、下調表達TaMIR1129的轉基

5、因株系植株形態(tài)、單株干鮮重與CK相比均無明顯變化。低氮條件下，與CK相比，上調表達TaMIR1129煙草植株抵御低氮脅迫的能力顯著增強，表現(xiàn)為與CK相比，植株形態(tài)增大，單株干物重顯著增加;下調表達TaMIR1129煙草植株形態(tài)學性狀與CK相比則無明顯差異。表明TaMIR1129在小麥及其他作物基因型（品種）耐低氮能力評價和氮高效種質創(chuàng)制中具有重要應用前景。
　　5.TaMIR1118靶基因TaCaM2-2和TaCaM2-3對低氮逆