1、石榴籽粒硬度是石榴品質(zhì)的重要組成，石榴籽粒的軟硬直接影響著口感和可食率。軟籽石榴具有籽軟可食的特點(diǎn)，目前在市面上更受歡迎。因此，研究石榴籽粒的硬度的產(chǎn)生機(jī)理具有重要的價(jià)值。
　　為了探討石榴籽粒硬度與石榴籽粒種皮總木質(zhì)素含量之間的相關(guān)性以及木質(zhì)素合成途徑中相關(guān)基因表達(dá)。試驗(yàn)以‘紅玉石籽’、‘白玉石籽’、‘粉皮’、‘會(huì)理軟籽’、‘蒙自甜石榴’和‘突尼斯軟籽’六個(gè)不同品種石榴籽粒，以及‘粉皮’的葉、莖、花、果皮和籽粒的五個(gè)組織為試材。

2、利用質(zhì)構(gòu)儀測(cè)定了不同品種的石榴籽粒硬度；運(yùn)用巰基乙酸法測(cè)定不同品種和整個(gè)發(fā)育周期中不同時(shí)期的石榴籽粒種皮總木質(zhì)素含量；通過RACE技術(shù)和EST庫克隆了石榴籽粒中與木質(zhì)素合成的相關(guān)酶基因；最后通過Real-time PCR分析克隆獲得的基因在不同品種、不同組織和不同發(fā)育時(shí)期的相對(duì)表達(dá)量。試驗(yàn)獲得的主要結(jié)果如下：
　　1、成熟的石榴果實(shí)籽粒的測(cè)定硬度與口感硬度基本一致。在六個(gè)品種中，籽粒硬度與籽粒種皮中總木質(zhì)素含量存在正相關(guān)性，相關(guān)系

3、數(shù)為0.9224。隨著果實(shí)發(fā)育，石榴籽粒種皮中總木質(zhì)素含量均呈上升趨勢(shì)，最終趨于穩(wěn)定。
　　2、克隆了石榴籽粒中4CL的全長(zhǎng)基因，生物信息學(xué)分析表明，Pg4CL基因的全長(zhǎng) cDNA為2121 bp，其中包含5’非編碼區(qū)168 bp，3’非編碼區(qū)318 bp和開放閱讀框1635 bp，編碼一個(gè)含有545個(gè)氨基酸的蛋白質(zhì)，其實(shí)密碼子為ATG，終止密碼子為TAA。Pg4CL基因登記Genebank,登陸號(hào)分別為AFU90743.1。通過

4、NCBI進(jìn)行同源性比對(duì)，Pg4CL與葡萄的4CL基因相似性最高達(dá)到了92.83％，其次依次為甜橙和毛果楊，相似性分別為92.62%和92.07%
　　3、克隆了石榴籽粒中CAD的全長(zhǎng)基因，生物信息學(xué)分析表明，PgCAD基因的全長(zhǎng) cDNA為1226 bp，其中包含5’非編碼區(qū)51 bp，3’非編碼區(qū)194 bp和開放閱讀框981 bp，編碼一個(gè)含有327個(gè)氨基酸的蛋白質(zhì)，其實(shí)密碼子為ATG，終止密碼子為TGA。PgCAD基因全長(zhǎng)序

5、列登記Genebank,登陸號(hào)為AFU90744.1。通過NCBI進(jìn)行同源性比對(duì)，PgCAD與玫瑰的CAD基因相似性最高達(dá)到了93.46%，其次依次為毛果楊和青梅，相似性分別為93.49%和92.87%。
　　4、在不同品種的石榴籽粒中，Pg4CL、PgCAD、PgC4H和PgCCoAOMT四個(gè)基因的均有表達(dá)，‘突尼斯軟籽’的四個(gè)基因的表達(dá)量相對(duì)都比較高，其他幾個(gè)品種的相對(duì)表達(dá)量與籽粒種皮總木質(zhì)素含量的存在正相關(guān)。
　　5、

6、在石榴的不同組織中，木質(zhì)素合成相關(guān)酶基因的表達(dá)量存在組織間差異。Pg4CL基因在皮中表達(dá)量最高，其次為葉和莖，在花和籽中的表達(dá)量較低；PgCAD基因在籽中表達(dá)量最高，其次是花，在葉片和果皮中不表達(dá)；PgC4H基因在葉中表達(dá)量最高，其次依次為皮和花，表達(dá)量在籽和莖中的表達(dá)量較低；PgCCoAOMT基因的相對(duì)表達(dá)量則是在花中較高，其次為葉和莖，而在皮和籽粒中表達(dá)量較低。
　　6、在盛花后的不同時(shí)期，4CL、CAD、CCoAOMT和C4