1、研究背景：
　　早產(chǎn)是一種常見的臨床現(xiàn)象,導致新生兒較高的死亡率和發(fā)病率。臨床證據(jù)表明,早產(chǎn)兒發(fā)生視覺損害和眼部疾病的風險明顯高于足月兒。早產(chǎn)可影響視網(wǎng)膜血管系統(tǒng)的結構和功能發(fā)育,從而使得早產(chǎn)兒罹患血管性疾病的閾值降低,臨床上最為常見的表現(xiàn)是早產(chǎn)兒視網(wǎng)膜病變(ROP)。ROP是一種復雜的視網(wǎng)膜新生血管性疾病,因早產(chǎn)兒的血管發(fā)育異常所致。視網(wǎng)膜血管化越不成熟,發(fā)生嚴重ROP的風險就越大。小胎齡和低出生體重是公認的發(fā)生ROP的最重要的

2、危險因素。但是,作為一種多因素致病性疾病,ROP的病因和病理機制目前尚未闡明。
　　大鼠氧誘導視網(wǎng)膜病變(OIR)模型廣泛用于 ROP的實驗研究中,其應用基礎為新生大鼠發(fā)育不成熟的視網(wǎng)膜血管系統(tǒng)與人類早產(chǎn)兒極其相似。然而,OIR采用的是足日齡生產(chǎn)的正常新生大鼠,它們出生時和出生后的病理生理狀態(tài)與早產(chǎn)兒有所不同。在新生大鼠中模擬早產(chǎn)兒出生后生長受限的研究發(fā)現(xiàn),出生后的生長發(fā)育情況決定了幼鼠正常視網(wǎng)膜血管化的速度和OIR中異常血管化的

3、程度。理論上,早產(chǎn)大鼠可在一定程度上模擬人類早產(chǎn)兒出生時的不成熟以及出生后的發(fā)育不良經(jīng)歷,能為研究“早產(chǎn)”這一因素在ROP中的作用提供一個良好的平臺。雖然早產(chǎn)大鼠模型已被廣泛用于研究人類發(fā)育相關性疾病,但目前有關早產(chǎn)大鼠的視網(wǎng)膜發(fā)育特點以及早產(chǎn)對大鼠OIR的影響尚無報道。
　　目的：
　　1.觀察早產(chǎn)大鼠的神經(jīng)視網(wǎng)膜、視網(wǎng)膜淺層毛細血管的結構以及視網(wǎng)膜功能的發(fā)育特點;
　　2.觀察早產(chǎn)大鼠在氧誘導條件下的視網(wǎng)膜血管病變

4、情況及視網(wǎng)膜中血管內皮生長因子(VEGF)和胰島素樣生長因子1(IGF-1)的表達水平。
　　方法
　　1.于Sprague Dawley(SD)大鼠孕19天時行剖宮產(chǎn),建立早產(chǎn)大鼠模型,觀察空氣中飼養(yǎng)的早產(chǎn)幼鼠的一般情況及體重變化。同時設正常足日齡生產(chǎn)的大鼠作為對照。
　　2.分別于幼鼠出生后4、7、10、14天行視網(wǎng)膜切片、HE染色及熒光標記的isolectin B4視網(wǎng)膜血管染色、鋪片,觀察幼鼠視網(wǎng)膜各層細胞和淺

5、層血管形態(tài),測量神經(jīng)視網(wǎng)膜各層厚度和未血管化區(qū)面積;分別于幼鼠出生后14、21、28、35天行視網(wǎng)膜電圖(ERG)檢測,記錄各波的波幅和潛伏期。
　　3.將新生大鼠在出生后6h內置于80％/21%濃度、24h交替的動物氧箱中,維持2周,于出生后15天返回空氣中飼養(yǎng),建立大鼠OIR模型;分別于出生后14、18、22天行熒光標記的isolectin B4視網(wǎng)膜血管染色、鋪片,觀察視網(wǎng)膜血管形態(tài),測量視網(wǎng)膜無血管區(qū)及新生血管區(qū)面積;采用

6、反轉錄多聚酶鏈式反應(RT-PCR)檢測視網(wǎng)膜中VEGF、IGF-1 mRNA的表達水平;于出生后18天行視網(wǎng)膜切片、HE染色,計數(shù)突破視網(wǎng)膜內界膜的血管內皮細胞數(shù)量。
　　結果：
　　1.剖宮產(chǎn)手術的成功率以及早產(chǎn)幼鼠的存活率較高。出生后3周內,早產(chǎn)幼鼠的體重低于足日齡幼鼠(P<0.001)。
　　2.早產(chǎn)幼鼠的視網(wǎng)膜各層細胞和淺層血管形態(tài)及發(fā)育趨勢與對照組相似;出生后早期,早產(chǎn)幼鼠的視網(wǎng)膜厚度大于對照組(P<0.0

7、5),2周時趨于一致;2周內早產(chǎn)幼鼠的視網(wǎng)膜無血管區(qū)明顯大于對照組(P<0.001),2周時兩組的視網(wǎng)膜血管化均已完成;出生2周后,早產(chǎn)鼠的ERG波幅和潛伏期與對照組相似。
　　3.波動氧干預后,早產(chǎn)幼鼠的視網(wǎng)膜一級血管迂曲程度與對照組相似;早產(chǎn)幼鼠14和18天的視網(wǎng)膜無血管區(qū)及18天的視網(wǎng)膜新生血管區(qū)面積大于對照組(P<0.001),早產(chǎn)幼鼠22天時殘留的視網(wǎng)膜血管病變較對照組更多(P<0.01)。早產(chǎn)幼鼠14、18、22天的視