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文檔簡介
1、通過對金銀花基原植物忍冬不同種質的生長發(fā)育及生理特性進行研究,為忍冬的引種及規(guī)范化栽培提供一定的理論基礎,采用DNA條形碼和實時熒光定量PCR技術對不同種質金銀花藥材進行鑒定,同時對忍冬不同部位中綠原酸代謝關鍵酶基因表達進行探討,以期為金銀花的分子生物學相關研究提供依據(jù)。實驗結論如下:
1.本文收集了忍冬不同種質材料12種,通過對不同種質忍冬的物候規(guī)律及生長指標的觀察比較發(fā)現(xiàn),忍冬的萌芽期和新梢生長期開始于2月中旬和3月初,但
2、不同種質之間差異較大,現(xiàn)蕾期和開花期開始于4月中旬和4月下旬及5月初,果期多集中開始于11月中下旬及12月初,12月中上旬后開始進入越冬期。
2.采用DNA條形碼序列(ITS2和psbA-trnH)對不同種質的金銀花進行鑒定,結果顯示不同種質金銀花的ITS2和psbA-trnH序列的擴增及測序成功率均較高,擴增成功率為100%,測序成功率分別為100%。兩序列存在較多變異位點,可以有效地區(qū)分不同種質的金銀花。
3.本
3、研究測定10個金銀花種質類型綠原酸、木犀草苷和總黃酮含量。結果表明,不同種質金銀花的綠原酸、木犀草苷以及總黃酮含量差異顯著。除巨花一號、大毛花、亞特金銀花的金花期外,其它花期綠原酸含量均高于藥典規(guī)定標準。所有種質木犀草苷的含量均達到藥典規(guī)定標準(2010)。
4.在忍冬抽枝生長初期,葉面噴施不同濃度的多效唑和縮節(jié)胺可增加花枝數(shù)量并延緩枝條生長速度、提高花蕾折干率,對葉片指標影響不顯著。不同濃度的多效唑和縮節(jié)胺均可促進總黃酮和綠
4、原酸含量的提高,最高達34.03%。除多效唑外,在噴施縮節(jié)胺時添加尿素和硼砂可起到促進吸收的作用。
5.研究噴施微量元素和氨基酸對忍冬生長發(fā)育和產量質量的影響,實驗證明葉面噴施不同濃度的Phe、Lyr以及Zn2+、Cu2+對葉面積無明顯影響。噴施不同濃度的Phe、Lyr可顯著影響碳代謝,對氮代謝影響不明顯。Zn2+、Cu2+對碳氮代謝產物影響較明顯。除Zn2+處理后的花蕾類黃酮含量顯著低于對照外,其他處理較CK無顯著差異?;ɡ?/p>
5、總黃酮含量均顯著低于對照,但綠原酸含量均高于對照。葉片中離子含量受噴施次數(shù)及濃度影響較明顯。除處理30 mg·L-1 CuSO4外,其它處理的花蕾中Zn2+、Cu2+、Fe2+含量均顯著低于對照。
6.研究葉面噴施青霉素對光合效應的影響,當濃度升高時,葉片中抗氧化酶活性逐漸升高,高濃度處理(800 mg·L-1)會抑制POD活性;低濃度(400 mg·L-1)的青霉素可顯著提高實際光化學效率(ΦPSⅡ)、光化學猝滅系數(shù)(qP)
6、以及電子傳遞速率(ETR)。當濃度為600 mg·L-1時,葉綠素a、b含量分別比對照升高8.6%、58.8%,青霉素濃度為800 mg·L-1時,氣孔導度(Gs)提高162.9%,但對ΦPSⅡ、ETR產生一定的抑制作用,并降低葉綠素的含量。
7.通過高效液相色譜儀對金銀花不同組織的綠原酸含量進行了測定,并采用實時熒光定量PCR技術對綠原酸合成途徑aroB基因的表達進行了分析。結果表明,金銀花不同組織綠原酸含量高低順序為花蕾>
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