1、幽門螺旋桿菌（Helicobacter pylori，H.pylori）是引起胃相關疾病的重要因素，世界衛(wèi)生組織將其列為Ⅰ類致癌因子。目前“三聯”或“四聯”療法是臨床治療H.pylori相關疾病的主要手段，但是耐藥菌株的出現導致該方法的治愈率越來越低，因此開發(fā)高效、安全、經濟且不會產生耐藥性的藥物顯得尤為迫切和重要。
　　卵黃抗體（Specific eggyolk immunoglobulin）IgY，是禽類主要的血清免疫球蛋白，

2、國內外研究表明幽門螺桿菌全菌或某類致病因子的重組蛋白制備的抗H.pylori特異性IgY也可以達到治療感染H.pylori的效果。
　　H.pylori在胃部低pH(＜2)情況下利用尿素酶水解從血液中擴散出的尿素為氨水和二氧化碳，在菌體周圍形成“氨云”中和胃酸。有利于H.pylori穿過胃黏液層，定植于胃上皮細胞表面。H.pylori尿素酶B亞單位是主要的功能單位，包含尿素酶的活性中心。尿素酶膜通道蛋白UreI對幽門螺桿菌在人和動

3、物體內生存起關鍵作用。
　　本實驗在前期對H.pylori的ureI和ureB基因的生物學作用進行研究的基礎上，成功的制備了抗SS1全菌的IgY和抗重組尿素酶的IgY，擬通過此體外抑菌實驗以及體內動物實驗來評價兩種IgY抗體的治療效果，為最終制備治療性抗幽門螺桿菌特異性抗體制劑提供基礎研究材料。本實驗的研究方法，結果與結論如下:
　　1.制備SS1-IgY和IB-IgY
　　以超破SS1菌液和IB重組蛋白為抗原免疫蛋雞

4、;水稀釋法和兩次硫酸銨沉淀法分離純化IgY; SDS-PAGE檢測純度，ELISA檢測效價，K5600檢測濃度。純化后的兩種IgY純度均超過80％，效價超過1∶12800，濃度可達30mg/ml。
　　2.兩種IgY體外抑菌效果評價
　　分別將兩種特異性IgY與新鮮H.pylori菌液混合后涂板孵育，對菌落克隆數進行統計分析。SS1-IgY組和IB-IgY組與生理鹽水組相比差異顯著，說明兩種IgY均可在體外抑制Hpylori

5、的生長。
　　3.兩種Igy對尿素酶的抑制作用
　　將新鮮H.pylori菌液超聲破碎后得到含有大量尿素酶的溶液，將其分別與兩種IgY混合孵育后進行快速脲酶檢測。結果表明兩種抗H.pylori特異性IgY均有抗尿素酶活性，且SS1-IgY的效果更好。
　　4.建立H.pylori感染BALB/c小鼠模型
　　6周齡小鼠，染菌前12h禁食禁水，前10min用0.2M碳酸氫鈉灌胃處理，以0.2ml濃度為1×108cf

6、u/ml的SS1菌液灌胃，共3次灌胃，每次間隔1d。4w后根據革蘭氏染色鏡檢、PCR，快速尿酶試驗檢測結果判定成功建立了H.pylori感染BALB/c小鼠模型。
　　5.兩種IgY在動物實驗中對H.pylon的抑制作用
　　將6周齡小鼠隨機分為7組，分別為IB-IgY3mmg組，6mmg組，SS1-IgY3mmg組，6mmg組，奧美拉唑與克拉霉素聯合組，陽性感染組與生理鹽水組。與建模時相同的處理方法對實驗組小鼠進行細菌灌胃