人參總皂苷的微生物轉(zhuǎn)化及藥理活性研究.pdf_第1頁
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文檔簡介

1、目的:考察從土壤中分離出的微生物(YS2-2)對人參總皂苷的生物轉(zhuǎn)化作用;并考察轉(zhuǎn)化產(chǎn)物作對Hela(宮頸癌細(xì)胞)的抑制以及對S180小鼠肉瘤的抑制作用。論文還考察了發(fā)酵產(chǎn)物對APAP(對乙酰氨基酚)所致小鼠肝損傷的保護(hù)作用。方法:從土壤中分離篩選出人參皂苷生物轉(zhuǎn)化高效菌株 YS2-2,對人參總皂苷進(jìn)行生物轉(zhuǎn)化。轉(zhuǎn)化條件為:R2A培養(yǎng)基,30℃震蕩培養(yǎng)4天。通過TLC(薄層色譜法)、HPLC(高效液相色譜法)檢測其轉(zhuǎn)化產(chǎn)物;將轉(zhuǎn)化產(chǎn)物用

2、DMSO(二甲基亞砜)配制成濃度分別為200μg/mL、100μg/mL、50μg/mL、25μg/mL。采用MTT法測定對宮頸癌細(xì)胞的抑制率;用腹水型S180腫瘤細(xì)胞,調(diào)整細(xì)胞濃度為1×107個/mL。將稀釋的瘤液接種于小鼠右腋下,每只小鼠0.2 mL造模24小時后,灌胃給予發(fā)酵人參300 mg/kg,150 mg/kg,50 mg/kg,7天后稱定腫瘤、胰腺及脾臟重量,考察發(fā)酵人參對S180的抑制作用及對免疫器官的影響。在考察發(fā)酵人

3、參對肝保護(hù)的實(shí)驗中,將藥物配置成300 mg/kg,200 mg/kg,1000 mg/kg,給予APAP所致小鼠肝損傷模型,測定其血清中的ALT(谷丙轉(zhuǎn)氨酶)、AST(谷草轉(zhuǎn)氨酶)值以及肝臟勻漿中的SOD(超氧化物歧化酶)、GSH(谷胱甘肽)值。結(jié)果:微生物 YS2-2對人參皂苷具有較強(qiáng)的轉(zhuǎn)化能力,其轉(zhuǎn)化產(chǎn)物為人參稀有皂苷Rg3和C-K。不同濃度的發(fā)酵人參對宮頸癌細(xì)胞的抑制率分別為29.48%,31.65%,34.53%,68.22%

4、。大中小劑量對S180小鼠肉瘤的抑制率分別為53.03%,34.51%,27.67%。對APAP所致小鼠肝損傷模型中,在給予300,200,100 mg/kg發(fā)酵人參后,可以降低因APAP導(dǎo)致的肝損傷小鼠血清中AST、ALT活力及肝臟中SOD、GSH水平。結(jié)論:從土壤中分離出的微生物YS2-2能夠轉(zhuǎn)化人參皂苷;并且轉(zhuǎn)化產(chǎn)物對宮頸癌細(xì)胞有抑制作用,低濃度的抑制作用最為明顯;對 S180小鼠肉瘤細(xì)胞的抑制作用,在高濃度是最為明顯;發(fā)酵人參對

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