線蟲生防菌厚垣普可尼亞菌的基因組學(xué)研究.pdf_第1頁
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文檔簡介

1、植物寄生線蟲對全世界農(nóng)業(yè)生產(chǎn)的危害很嚴(yán)重,厚垣普可尼亞菌是目前公認(rèn)的線蟲生防菌之一,研究該菌跟其他盤菌亞門真菌的分化情況、與生存環(huán)境和寄主之間的協(xié)同關(guān)系、及其致病基因和致病機理有非常重要的意義。在生命科學(xué)的研究中,遺傳學(xué)、生物化學(xué)、比較基因組學(xué)和生物信息學(xué)提供了很多方法和工具,而開展厚垣普可尼亞菌基因組學(xué)的研究可以充分利用這些工具,促進與厚垣普可尼亞菌相關(guān)的研究的發(fā)展。
  首先,通過測序和組裝獲取到厚垣普可尼亞菌的第一個完整的線

2、粒體基因組。其大小為25615bp,編碼40個基因(15個開放閱讀框(ORFs):coxl-3、cob、atp6、atp8-9、nadl-6、nad4L、rps3;2個rRNA基因:rnl、rns;23個tRNA基因)?;?4個ORF的序列用最大似然法構(gòu)建的系統(tǒng)發(fā)育樹表明厚垣普可尼亞菌與金龜子綠僵菌的親緣關(guān)系最近(bootstrap值100%支持),它與昆蟲寄生菌、植物病原菌有共同的祖先。在線粒體基因組DNA水平上,厚垣普可尼亞菌87

3、.20%的序列與金龜子綠僵菌90.05%的序列相似,一共有10個區(qū)域相匹配;而其他真菌只匹配到厚垣普可尼亞菌的小于或等于61.07%的序列。包括厚垣普可尼亞菌在內(nèi)的麥角科真菌基因組的ORFs編碼順序是一樣的,但是基因組之間的大小差異較大;本研究發(fā)現(xiàn)編碼基因區(qū)、基因間區(qū)和內(nèi)含子區(qū)是影響線粒體基因組大小的三個基本因素。對影響核糖體合成和DNA修復(fù)的rps基因,分析結(jié)果發(fā)現(xiàn)它是正向選擇的,它有明顯區(qū)別于線粒體基因組的進化特征。
  其次

4、,本研究獲取到組裝質(zhì)量較高、完整性較好的厚垣普可尼亞菌核基因組草圖(全長約43.9Mb;scaffold N50為4.1 Mb)?;蚪M的重復(fù)序列為5.24%,編碼15009個ORF,其中70.7%的基因都有功能注釋信息。與昆蟲寄生菌、捕食線蟲真菌、植物病原菌的比較發(fā)現(xiàn),厚垣普可尼亞菌與金龜子綠僵菌、球孢白僵菌共有的基因家族數(shù)目最多;在KOG功能簇的分布中,厚垣普可尼亞菌的基因數(shù)目介于植物病原菌和昆蟲寄生菌的基因數(shù)之間。分析發(fā)現(xiàn)厚垣普可

5、尼亞的致病基因很豐富,包括66個P450酶(51個家族)、68個ABC轉(zhuǎn)運蛋白(其中33個是the Pathogen HostInteraction, PHI基因)、1551個分泌蛋白(含水解酶、G蛋白偶聯(lián)受體、毒性蛋白、疏水蛋白、幾丁質(zhì)結(jié)合蛋白等;其中有120個半胱氨酸富集的小分泌蛋白)、247個蛋白酶(含與VCP1功能相似的絲氨酸蛋白酶、saccharolysin、溶神經(jīng)素等)。通過比較糖苷水解酶和碳水化合物酯酶,發(fā)現(xiàn)這些酶存在明顯

6、的基因簇:線蟲寄生菌富集的水解酶基因簇、線蟲寄生菌和昆蟲寄生菌都富集的水解酶基因簇、線蟲寄生菌(同時也是植物內(nèi)生菌)和植物病原菌都富集的水解酶基因簇,這表明簇內(nèi)富集的功能基因與菌株的特性、生物學(xué)功能緊密相關(guān)。另外在基因組中發(fā)現(xiàn)有56個次生代謝產(chǎn)物基因;在已報道的根赤殼菌素基因簇中,分析發(fā)現(xiàn)一個包含可以調(diào)節(jié)蛋白與蛋白相互作用的錨定重復(fù)序列的基因,它可能參與根赤殼菌素的合成;而且至少還有10個包含P450或轉(zhuǎn)運蛋白但產(chǎn)物未知的次生代謝基因簇

7、。
  綜上所述,線粒體基因組的分析對后續(xù)開展關(guān)于厚垣普可尼亞菌的比較基因組學(xué)、進化生物學(xué)的研究打下豐富的數(shù)據(jù)基礎(chǔ);也可以借鑒分析哺乳動物線粒體基因組的方法,將來開展線粒體與菌株致病力相關(guān)聯(lián)的研究;而豐富的核基因組注釋信息和詳細的比較分析數(shù)據(jù)揭示了厚垣普可尼亞菌的基因組特征以及它跟其他病原真菌的關(guān)聯(lián)性,為深入研究它的生物學(xué)(包括致病基因、致病機理、與寄主的相互作用、與環(huán)境的協(xié)同關(guān)系等)打下了基礎(chǔ),能促進生防菌研究,為開展植物線蟲病

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