1、鴨坦布蘇病毒感染（TMUV infection）是2010年我國新發(fā)的一種急性傳染性疾病。TMUV屬于黃病毒科，黃病毒屬，恩塔亞病毒群。TMUV可感染危害多個品種的鴨，主要造成5-15日齡的雛鴨食欲減退、生長緩慢和神經癥狀，死淘率可達5％-10%，育成鴨感染后臨床癥狀輕微，死亡率較低，產蛋鴨的產蛋率大幅下降，產蛋率從90%降至10%以下，該病的發(fā)生給我國養(yǎng)禽業(yè)造成了巨大的經濟損失。
　　免疫預防是防控TMUV感染的重要措施之一，本

2、研究利用實驗室分離到的TMUV SDS株進行傳代致弱，利用致弱毒株SDS-70株對雛鴨進行免疫，對其免疫保護效果進行了評價。
　　本研究對從山東省某種鴨場分離的一株TMUV，采用SPF鴨胚和SPF雞胚進行交替?zhèn)鞔晒χ氯踉摱局辍Λ@得的不同代次的傳代病毒進行致弱效果分析，對不同代次的弱毒株進行免疫效果比對，結果顯示SDS-70具有較好的免疫原性。
　　對篩選到的SDS-70傳代毒株進行免疫效力的評價。7日齡櫻桃谷鴨（無TMU

3、V母源抗體），每只腿肌注射102.46EID50的SDS-70的弱毒疫苗，20日齡進行第2次免疫，在2免后一周，利用同源強毒SDS-10對免疫組和對照組分別進行攻毒，攻毒劑量為1mL（102.9ELD50）。免疫后，觀察各組精神狀態(tài)并記錄；定期采血檢測抗體水平；定期采集免疫組與同居感染組的泄殖腔棉試子，利用熒光定量RT-PCR方法進行排毒情況的檢測；定期剖殺，采集各組織器官進行帶毒情況檢測與病理組織學研究。結果免疫組和對照組均精神狀態(tài)良

4、好，無明顯的臨床癥狀和病理變化，無發(fā)病和死亡情況。病理組織學檢測結果顯示，脾臟出現出血，后期出血減輕，心肌出現輕微水腫現象，其余各組織器官均無明顯的病理學損傷，結果表明 SDS-70對雛鴨無致病性，免疫性和安全性良好。攻毒試驗結果顯示SDS-70免疫過的櫻桃谷鴨對強毒SDS-10的攻擊具有100%的臨床保護力。
　　對SDS-70弱毒疫苗進行純凈性檢測，包括支原體、細菌和外源病毒的檢測，檢測結果均為陰性，說明該弱毒疫苗純凈。將 S

5、DS-70在鴨體內連續(xù)傳代5次，各代次的試驗鴨均無臨床癥狀，精神良好，剖檢內臟組織器官無病理變化，收集各個代次的病料進行RT-PCR檢測，結果為陽性，表明SDS-70具有良好的穩(wěn)定性，體內傳代后毒力無返強情況。
　　對20、40、60、80和100代次的傳代毒株進行全基因組序列分析，與SDS原始毒株全基因組序列相比較，結果20、40、60、80和100代5個代次的傳代病毒株共出現了33堿基突變，包括18個導致氨基酸發(fā)生變化的位點和

6、15個中性突變點。對E蛋白氨基酸序列上的N-連接的潛在糖基化位點進行預測，根據預測結果可以看出，在SDS-80代次時在E基因上出現了一個糖基化位點的缺失，根據氨基酸變化分析可知，該糖基化位點的缺失是由于E蛋白154位上N變?yōu)镠，改變了糖基化位點的固有結構，導致該位點消失。據此推測病毒毒力的改變可能是堿基的突變所導致的。
　　綜上所述，SDS-70弱毒疫苗株對櫻桃谷鴨安全性、純凈性與免疫效力較好，并且毒力穩(wěn)定，可以作為TMUV弱毒疫