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文檔簡介
1、目的:探討大蒜素對脂多糖(LPS)誘導(dǎo)人牙周膜成纖維細胞(hPDLCs)凋亡及分泌IL-1β、TNF-α的影響。
方法:在組織貼壁法體外成功培養(yǎng)hPDLCs的基礎(chǔ)上
1.利用MTT法檢測大蒜素和LPS對hPDLCs的抑制作用;采用AO/EB染色技術(shù)觀察大蒜素對LPS誘導(dǎo)hPDLCs凋亡的形態(tài)學(xué)改變;流式細胞術(shù)對凋亡細胞進行定量分析。
2.ELISA技術(shù)檢測大蒜素對LPS誘導(dǎo)hPDLCs分泌IL-
2、1β、TNF-α的影響。
結(jié)果
1.當(dāng)LPS濃度為1μg/ml至100μg/ml時,隨著濃度的增長其抑制作用增大(P<0.05)。大蒜素的各作用濃度均對hPDLCs有抑制作用,隨著大蒜素濃度的不斷增大其抑制作用增強(P<0.05)。
2.AO/EB染色觀察正常對照組中細胞形態(tài)正常,胞核及胞漿呈綠色;1μg/ml LPS組細胞核呈綠色,細胞質(zhì)為綠色略帶紅色,偶有細胞體積變圓,發(fā)出橘紅色熒光;LPS
3、與3μg/ml大蒜素共同作用時多數(shù)細胞呈綠色;LPS與6μg/ml大蒜素共同作用時多數(shù)細胞核呈綠色熒光,細胞質(zhì)為綠色略帶紅色;LPS與9μg/ml大蒜素共同作用時多數(shù)細胞變圓,發(fā)出橘紅色熒光。
3.流式細胞定量分析顯示:與對照組相比,各大蒜素組細胞早期凋亡率和總凋亡率明顯增加(P<0.05)。LPS組與對照組比較比較早、晚期及總凋亡率均增加(P<0.05)。與LPS單獨作用hPDLCs比較,LPS與3μg/ml大蒜素共同作
4、用時總凋亡率降低(P<0.05);LPS與6μg/ml大蒜素共同作用時各凋亡率降低(P>0.05);LPS與9μg/ml大蒜素共同作用時晚期凋亡率和總凋亡率升高(P<0.05)。
4.ELISA結(jié)果顯示:各個實驗組與對照組比較,IL-1β與TNF-α分泌量明顯升高(P<0.05)。LPS與大蒜素共同作用與LPS單獨作用比較,IL-1β與TNF-α分泌量降低(P<0.05)。
結(jié)論
1.大蒜素和/
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