血小板衍生膜微粒促血管生成的實(shí)驗(yàn)研究.pdf_第1頁
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文檔簡介

1、目的:應(yīng)用血小板衍生膜微粒(PMPs),通過體內(nèi)外實(shí)驗(yàn)研究其對血管生成的影響,為臨床如何促進(jìn)組織損傷的修復(fù)提供理論支持。如果能有效促進(jìn)血管功能的恢復(fù),將有重要的臨床意義。 方法:用凝血酶激活血小板釋放出PMPs,再經(jīng)高速離心分離出PMPs,用流式細(xì)胞儀(FCM)檢定PMPs,并用BCA法測定PMPs的蛋白含量;采用噻唑藍(lán)(MTT)實(shí)驗(yàn)和FCM,觀察不同濃度的PMPs對建株人臍靜脈內(nèi)皮細(xì)胞ECV304增殖和凋亡的影響;將PMPs接

2、種于雞胚絨毛尿囊膜(CAM)上,觀察PMPs對CAM血管生成的影響。 結(jié)果:1.0U/ml凝血酶激活血小板后的PMPs釋放率為50.1%,經(jīng)高速離心后得到的PMPs純度大于99%。ECV304細(xì)胞的增殖與PMPs呈劑量依賴關(guān)系,在培養(yǎng)液中添加40μg/ml PMPs時(shí),ECV304細(xì)胞增殖是空白對照組的1.8±0.3倍,與10μl/ml血管內(nèi)皮細(xì)胞生長因子(VEGF)組(增殖是空白對照組的1.9±0.5倍)相比,無統(tǒng)計(jì)學(xué)差異,(

3、p>0.05);PMPs能抑制ECV304細(xì)胞的凋亡,40μg/ml PMPs組的細(xì)胞凋亡率為(3.9±0.4)%,明顯低于空白對照組的細(xì)胞凋亡率(9.4±0.5)%,p<0.05。VEGF(10μl/ml)對ECV304細(xì)胞的凋亡無明顯抑制作用,其凋亡率為(8.0±0.8)%。當(dāng)將80μg/ml PMPs接種于CAM上,孵育72小時(shí)后,混合纖維素濾膜周圍可見到放射狀密集生長的血管網(wǎng),血管分支數(shù)為112.5±11.31,血管面積為6.1

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