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1、目的:系統(tǒng)性紅斑狼瘡(SLE)是一種自身免疫系統(tǒng)疾病,其發(fā)病機(jī)制尚不清楚,但一般認(rèn)為此疾病存在T細(xì)胞數(shù)量與功能異常。在對(duì)CD48、CD244分子功能的研究中發(fā)現(xiàn),CD48/CD244相互作用可調(diào)節(jié)T細(xì)胞的增殖與效應(yīng)功能。本實(shí)驗(yàn)將通過(guò)流式細(xì)胞儀的檢測(cè)方法,對(duì)狼瘡性腎炎(LN)患者外周血T淋巴細(xì)胞表面CD48、CD244分子表達(dá)情況進(jìn)行檢測(cè),以期在分子水平上探明CD48、CD244在T細(xì)胞上的變化情況與狼瘡性腎炎發(fā)病的相關(guān)性。 材料
2、和方法1.實(shí)驗(yàn)試劑、材料和儀器。 PE熒光標(biāo)記鼠抗人CD3單克隆抗體,PerCP熒光標(biāo)記鼠抗人CD8單克隆抗體,F(xiàn)ITC熒光標(biāo)記鼠抗人CD48單克隆抗體,F(xiàn)ITC鼠抗人CD244單克隆抗體,紅細(xì)胞裂解液,F(xiàn)ACScan型流式細(xì)胞儀,低溫離心機(jī),恒溫水浴循環(huán)儀。 2.研究對(duì)象符合1982年美國(guó)風(fēng)濕病協(xié)會(huì)制定的判斷標(biāo)準(zhǔn)確診為SLE且伴腎炎表現(xiàn)者25例,其中活動(dòng)期19例,穩(wěn)定期6例。正常對(duì)照15例,均為健康獻(xiàn)血員。 3
3、.臨床及實(shí)驗(yàn)資料:來(lái)源于我院病例記載和實(shí)驗(yàn)測(cè)得結(jié)果。 4.實(shí)驗(yàn)方法:4.1標(biāo)本采集。 4.2抗原抗體反應(yīng)。 4.3將標(biāo)本制作為淋巴細(xì)胞懸液。 4.4通過(guò)流式細(xì)胞儀進(jìn)行檢測(cè)。 4.5應(yīng)用CellQuesPlot軟件進(jìn)行數(shù)據(jù)分析。 5.統(tǒng)計(jì)分析采用SPSS軟件。 結(jié)果LN病例活動(dòng)組CD4+T細(xì)胞百分?jǐn)?shù)較正常對(duì)照組明顯降低(P<0.05),LN病例未活動(dòng)組CD4+T細(xì)胞百分?jǐn)?shù)也降低,但與
4、正常對(duì)照組比較無(wú)顯著差異(P>0.05)。LN病例活動(dòng)組與未活動(dòng)組CD8+T細(xì)胞百分?jǐn)?shù)均較正常對(duì)照組明顯升高(P<0.05),活動(dòng)組更明顯。LN病例活動(dòng)組與未活動(dòng)組CD4/CD8比值均較正常對(duì)照組明顯降低(P<0.05)。 LN病例活動(dòng)組CD48在CD8+T細(xì)胞表面的表達(dá)顯著低于正常對(duì)照組(P<0.05),未活動(dòng)組CD48在CD8+T細(xì)胞表面的表達(dá)與正常對(duì)照組無(wú)顯著差異(P>0.05),CD8+T細(xì)胞表面CD48平均熒光強(qiáng)度與S
5、LEDAI評(píng)分呈負(fù)相關(guān)(r=-0.63,P<0.01)。 CD244在CD8+T細(xì)胞表面的表達(dá)在LN病例組、對(duì)照組及LN病例組各亞組之間無(wú)明顯差別(P>0.05)。CD8+T細(xì)胞表面CD244平均熒光強(qiáng)度與SLEDAI評(píng)分無(wú)相關(guān)性(P>0.1)。 CD48、CD244在CD4+T細(xì)胞表面的表達(dá)在LN病例組、對(duì)照組及LN病例組各亞組之間無(wú)明顯差別(P>0.05)。CD4+T細(xì)胞表面CD48、CD244平均熒光強(qiáng)度與SLED
6、AI評(píng)分無(wú)相關(guān)性(P>0.1)。 結(jié)論1.LN病例活動(dòng)組CD4+T細(xì)胞的百分率顯著下降,未活動(dòng)組CD4+T細(xì)胞的百分率也降低,但與正常對(duì)照組比較無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。 2.LN病例組CD8+T細(xì)胞的百分率升高,活動(dòng)期更明顯。 3.LN病例組CD4/CD8比值明顯下降,隨著病情穩(wěn)定,CD4/CD8比值呈上升趨勢(shì)。 4.LN病例活動(dòng)組CD48在CD8+T細(xì)胞表面的表達(dá)顯著低于正常對(duì)照組與未活動(dòng)組,且LN病例組CD8+
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