1、在校正DNA復制錯誤的生化途徑中，錯配修復通路(MMR)起至關重要的作用。依靠移除DNA新生鏈上的錯誤合成堿基，錯配修復將DNA復制的忠實性提高了幾個數量級。錯配修復系統(tǒng)的缺失會造成突變表型和易于發(fā)生癌癥。此外，錯配修復也影響減數分裂和有絲分裂重組，DNA損傷信號傳遞，凋亡和某些細胞種類特異性的過程，比如淋巴細胞高頻突變，類別轉換和重復序列的擴增。 錯配修復和DNA復制是緊密相關的。本研究主要以大腸桿菌錯配修復系統(tǒng)為研究對象，針

2、對大腸桿菌DNA聚合酶Ⅲ是如何協(xié)同錯配修復蛋白進行錯修復的生化過程進行了探索和研究。我們首次發(fā)現大腸桿菌錯配修復蛋白MutL能夠和DNA聚合酶Ⅲ中組成Clamploader的三個亞基δ，δ'，和γ相互作用，并且親和常數顯示它們之間的相互作用很穩(wěn)定。這個結果暗示了MutL可能在招募DNA聚合酶Ⅲ亞基參與錯配修復切除后在合成的過程中起到了重要作用；此外，MutL和Clamploader亞基的相互作用受到ATP的調控；缺失突變試驗還表明Mut

3、L的N端或者C端都能夠和Clamploader的三個亞基δ，δ'，和γ相互作用。這些新發(fā)現的相互作用，加上前人的研究，讓我們繪制出大腸桿菌錯配修復系統(tǒng)和DNA聚合酶Ⅲ亞基之間的聯系網絡。 除了發(fā)現這些新的相互作用，我們還研究了MutS和DNA聚合酶Ⅲ亞基之一的βclamp之間相互作用的生物學功能。我們發(fā)現位于MutS的N端和C端的兩個βclamp結合位點有著不同的生物學功能：C端的強結合位點讓兩個蛋白結合在一起，而N端的弱結合位

4、點調控MutS，錯配DNA和βclamp之間的關系。我們的實驗證據表明，MutSC端βclamp結合位點可能是引導MutS跟隨復制叉移動來尋找錯配，而MutSN端βclamp結合位點著能夠促使MutS結合錯配之后和βclamp結合位點解離。這些發(fā)現對于理解MutS是如何找到錯配并且開始啟動錯配修復的機制提供了線索。此外，我們還研究了錯配修復系統(tǒng)之外的蛋白結合錯配的特征以及錯配修復關鍵蛋白MutL對不同類型DNA的結合，表明了除了已知的錯