1、目的：研究重組人干擾素-ω對(duì)腫瘤細(xì)胞的影響，篩選對(duì)干擾素-ω敏感的腫瘤細(xì)胞株，估價(jià)干擾素-ω在體內(nèi)、外對(duì)人腫瘤細(xì)胞生長(zhǎng)及轉(zhuǎn)移的抑制作用，并初步探討其抗腫瘤作用的機(jī)制。比較干擾素-ω與干擾素-α抗腫瘤特性的異同點(diǎn)，確定是否可以作為干擾素-α的一種替代或優(yōu)化產(chǎn)品。方法：體外培養(yǎng)各種人腫瘤細(xì)胞株(乳腺癌、肺癌、肝癌、前列腺癌、黑色素瘤、白血病、胃癌、結(jié)腸癌)，加入本室自行研制的基因工程人干擾素-ω或市售的干擾素-α，作用濃度從100-2000

2、U/ml，選出可以發(fā)揮作用的最低濃度，MTT法檢測(cè)干擾素對(duì)腫瘤細(xì)胞增殖的影響；明膠酶譜法檢測(cè)細(xì)胞基質(zhì)金屬蛋白酶的分泌；利用Boyden小室檢測(cè)腫瘤細(xì)胞的侵襲能力。選擇體外研究中對(duì)干擾素-ω及α敏感的人肝癌細(xì)胞系HepG2細(xì)胞作為體內(nèi)研究的對(duì)象，106皮下接種于BALB/C裸鼠，干擾素瘤旁1cm內(nèi)10萬單位隔天皮下注射作為實(shí)驗(yàn)組，PBS作為對(duì)照組，隔天測(cè)量瘤體的大??；4周后小鼠處死取生長(zhǎng)的瘤塊及近處淋巴結(jié)、肝、肺、脾等臟器甲醛固定，HE染

3、色觀察腫瘤細(xì)胞向附近淋巴結(jié)及其它臟器的轉(zhuǎn)移情況，免疫組化法檢測(cè)生長(zhǎng)腫瘤組織細(xì)胞增殖核抗原PCNA的表達(dá)；TUNEL法檢測(cè)腫瘤細(xì)胞的凋亡。結(jié)果：人干擾素-ω及α可以抑制某些腫瘤細(xì)胞株(如肝癌細(xì)胞系HepG2、前列腺癌細(xì)胞系PC3、肺癌細(xì)胞系LH7、BE1、白血病細(xì)胞系K562等)的增殖，抑制率從11.2％-29.9％；低劑量的干擾素-ω及α(500U/ml)即有抗腫瘤細(xì)胞增殖的作用?；|(zhì)金屬蛋白酶作為一種細(xì)胞外基質(zhì)蛋白的分解酶而參與細(xì)胞的

4、遷移和侵襲，與腫瘤細(xì)胞的轉(zhuǎn)移十分相關(guān)。明膠酶譜法檢測(cè)發(fā)現(xiàn)干擾素-ω及α對(duì)所檢測(cè)的12種腫瘤細(xì)胞株細(xì)胞基質(zhì)金屬蛋白酶的分泌沒有影響。Boyden小室檢測(cè)干擾素-ω及α對(duì)人肝癌細(xì)胞系HepG2細(xì)胞侵襲能力有明顯的抑制作用；干擾素-ω及α治療組荷瘤小鼠腫瘤體積明顯小于對(duì)照組；HE染色顯示HepG2細(xì)胞可以向近側(cè)腋窩淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移，兩組未見差異，未發(fā)現(xiàn)有其它臟器的轉(zhuǎn)移；干擾素-ω組裸鼠生長(zhǎng)腫瘤PCNA表達(dá)明顯低于對(duì)照組；腫瘤細(xì)胞的凋亡明顯增加。結(jié)論