1、近年來，揚州市高郵區(qū)域部分羅氏沼蝦(Macrobrachium rosenbergii)養(yǎng)殖塘口出現(xiàn)“生長緩慢”癥狀，蝦農(nóng)統(tǒng)稱為“鐵殼蝦”，“鐵殼蝦”現(xiàn)象凸顯，給蝦農(nóng)帶來了一定的經(jīng)濟損失和巨大的精神壓力。國內(nèi)學者從多方面對其進行了研究，但是，迄今為止，對于引起羅氏沼蝦生長阻滯現(xiàn)象的主要原因仍無定論。羅氏沼蝦作為甲殼動物，其生長伴隨著蛻殼的過程，而蛻殼受到蛻殼激素的影響，生長阻滯的羅氏沼蝦有可能存在激素水平的異常，而與激素相關的基因表達也

2、可能表現(xiàn)出不同。因此，本論文假定，生長阻滯羅氏沼蝦的激素含量及其相關基因的表達完全不同于生長正常的羅氏沼蝦。為了驗證上述假說，本論文以高郵區(qū)域人工飼養(yǎng)的羅氏沼蝦為研究對象，首先測定采集樣本個體的形態(tài)學參數(shù)，采用不同的數(shù)學統(tǒng)計方法對各形態(tài)學參數(shù)進行分析，確定鑒定羅氏沼蝦生長阻滯個體的最佳統(tǒng)計學方法和最佳度量的參數(shù);然后按照以上確定的最佳參數(shù)對不同的樣本進行分類，對分類個體進行蛻皮時期的判別，選擇蛻皮間期的羅氏沼蝦，通過酶聯(lián)免疫法測定各類樣

3、本中蛻皮激素、蛻皮抑制激素和甲基法尼酯的含量，通過熒光定量PCR測定各類樣本的肝胰腺和眼柄中生長相關基因的mRNA表達水平，通過Western Blot測定各類樣本的肝胰腺和眼柄中EcR蛋白的表達，探討各類激素及其相關基因在生長阻滯現(xiàn)象中的作用，揭示影響水生甲殼類動物生長的生理調(diào)控機制，為廣大養(yǎng)殖戶的健康養(yǎng)殖提供可能的新措施和新方法。研究結(jié)果如下:
　　1)聚類分析中能夠?qū)颖緞澐譃檎Ｎr、正常幼蝦和阻滯蝦的參數(shù)有體重、肥滿度和第

4、一尾節(jié)寬度/體長;主成分分析中能夠區(qū)分三類蝦的參數(shù)有體長、腹尾長、螯長、第一尾節(jié)寬度、體長/體重、腹尾長/體重;相關性分析中能夠區(qū)分三類蝦的參數(shù)有體重、體長、腹尾長、第一尾節(jié)寬度、體長/體重、腹尾長/體重。綜合分析認為，聚類分析是最佳統(tǒng)計學方法，體重、肥滿度和第一尾節(jié)寬度/體長3個參數(shù)是最佳統(tǒng)計學參數(shù)。區(qū)分正常蝦、正常幼蝦和阻滯蝦的參數(shù)標準為:雄性體重參數(shù)范圍22.1668～25.1034、17.0517～17.6608和13.4706

5、～14.214，雄性肥滿度參數(shù)范圍1.1598～1.2127、1.2541～1.2640和1.1274～1.1556，雄性第一尾節(jié)寬度/體長比值參數(shù)范圍0.1294～0.1360、0.1363～0.1384和0.1435～0.1494;雌性體重參數(shù)范圍18.1526～19.9768、13.2198～14.0242和11.1046～11.9157，雌性肥滿度參數(shù)范圍1.1332～1.1563、1.1873～1.2075和1.1010～1.

6、1107;雌性第一尾節(jié)寬度/體長比值參數(shù)范圍0.1327～0.1376、0.1392～0.1414和0.1415～0.1441。
　　2)2015年8月采集的樣本中，雄性阻滯蝦20E水平顯著低于正常蝦(P＜0.05)，雌性阻滯蝦20E水平顯著低于正常蝦和正常幼蝦(P＜0.05);雌性阻滯蝦MIH水平顯著高于正常蝦和正常幼蝦(P＜0.05);雌雄阻滯蝦MF水平均顯著低于正常蝦(P＜0.05)。2016年6月采集的樣本中，雄性阻滯蝦2

7、0E水平顯著低于正常蝦和正常幼蝦（P＜0.05），雌性阻滯蝦20E水平顯著低于正常蝦(P＜0.05);雌雄阻滯蝦MIH水平均顯著高于正常蝦和正常幼蝦（P＜0.05）;雌性阻滯蝦MF水平顯著低于正常蝦和正常幼蝦(P＜0.05)。
　　3)2015年8月采集的樣本中，雄性阻滯蝦肝胰腺中的EcR mRNA表達量顯著低于正常蝦(P＜0.05)，MIH mRNA表達量顯著高于正常蝦和正常幼蝦(P＜0.05)，RxR mRNA表達量顯著低于正

8、常蝦和正常幼蝦（P＜0.05），雄性阻滯蝦眼柄中的MIH mRNA表達量顯著高于正常幼蝦(P＜0.05);雌性阻滯蝦肝胰腺中的EcR mRNA表達量顯著低于正常蝦和正常幼蝦（P＜0.05），JHEH mRNA表達量顯著高于正常幼蝦，MIH mRNA表達量顯著高于正常蝦和正常幼蝦（P＜0.05）。2016年6月采集的樣本中，雄性阻滯蝦肝胰腺中的EcR和RxR mRNA表達量均顯著低于正常蝦和正常幼蝦(P＜0.05)，GIH、 MIH和JH

9、EH mRNA表達量均顯著高于正常蝦和正常幼蝦(P＜0.05)，雄性阻滯蝦眼柄中的GIH和MIH mRNA表達量顯著高于正常蝦和正常幼蝦(P＜0.05);雌性阻滯蝦肝胰腺中的EcR和RxR mRNA表達量顯著低于正常蝦和正常幼蝦(P＜0.05)，GIH和MIH mRNA表達量顯著高于正常蝦和正常幼蝦(P＜0.05)，JHEH mRNA表達量顯著高于正常幼蝦(P＜0.05)，雌性阻滯蝦眼柄中的GIH和MIH mRNA表達量顯著高于正常蝦和

10、正常幼蝦(P＜0.05)。
　　4)2015年8月采集的樣本中，雌性阻滯蝦和正常幼蝦眼柄中的EcR含量顯著低于正常蝦(P＜0.05)。2016年6月采集的樣本中，雄性阻滯蝦肝胰腺中的EcR含量顯著低于正常蝦(P＜0.05);雌性阻滯蝦眼柄中的EcR含量顯著低于正常蝦（P＜0.05）。
　　以上結(jié)果表明，聚類分析、主成分分析和相關性分析均可區(qū)分生長阻滯羅氏沼蝦，聚類分析是區(qū)分的最佳統(tǒng)計學方法，而體重、肥滿度和第一尾節(jié)寬度/體長