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1、吉西他濱干擾TRAIL介導(dǎo)的HepG2細(xì)胞凋亡的研究中文摘要目的:應(yīng)用化療藥物吉西他濱干預(yù)已構(gòu)建好的肝癌細(xì)胞株HepG2(通過(guò)慢病毒轉(zhuǎn)染的TRAIL基因在其內(nèi)穩(wěn)定表達(dá)),通過(guò)實(shí)驗(yàn)組與對(duì)照組中該藥物對(duì)HepG2細(xì)胞凋亡的作用,觀察該藥物是否能夠產(chǎn)生上調(diào)增強(qiáng)TRAIL介導(dǎo)的HepG2細(xì)胞的凋亡。方法:1、HepG2細(xì)胞培養(yǎng)。2、TRAIL慢病毒轉(zhuǎn)染HepG2細(xì)胞。3、化療藥物(吉西他濱)干預(yù)TRAIL慢病毒轉(zhuǎn)染后HepG2細(xì)胞。4、ELIS
2、A檢測(cè)caspase一8的活性。5、流式細(xì)胞術(shù)檢測(cè)HepG2細(xì)胞周期及凋亡情況。結(jié)果:成功構(gòu)建肝癌細(xì)胞株HepG2(通過(guò)慢病毒轉(zhuǎn)染的TRAIL基因在其內(nèi)穩(wěn)定表達(dá)),建立實(shí)驗(yàn)組及對(duì)照組,實(shí)驗(yàn)組應(yīng)用化療藥物吉西他濱,對(duì)照組應(yīng)用溶解化療藥物吉西他濱的溶液。48小時(shí)后用ELASA檢測(cè)Caspase8的活性,其在405rim處吸光值增加,應(yīng)用流式細(xì)胞學(xué)檢測(cè)后HepG2細(xì)胞周期及凋亡比例,發(fā)現(xiàn)實(shí)驗(yàn)組凋亡比例明顯高于對(duì)照組,且P值0。05,有意義。結(jié)
3、論:首先構(gòu)建的肝癌細(xì)胞株HepG一2(通過(guò)慢病毒轉(zhuǎn)染的TRAIL基因在其內(nèi)穩(wěn)定表達(dá)),通過(guò)在實(shí)驗(yàn)組及對(duì)照組中應(yīng)用濃度為0。05pg/mL化療藥物吉西他濱,觀察實(shí)驗(yàn)組與對(duì)照組中Caspase8的活性和處于不同細(xì)胞周期及細(xì)胞凋亡周期的比例,發(fā)現(xiàn)吉西他濱可以增強(qiáng)攜帶TRAIL基因的慢病毒轉(zhuǎn)染后的HepG2中Caspase一8的活性,同時(shí)使得實(shí)驗(yàn)組的HepG2處于凋亡期的細(xì)胞比例增加,實(shí)驗(yàn)組與對(duì)照組組凋亡比例的差別有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P005)。說(shuō)明
4、該藥物是否能夠產(chǎn)生上調(diào)增強(qiáng)TRAIL介導(dǎo)的HepG2細(xì)胞的凋亡。碩士研究生商和振(肝膽血管外科)指導(dǎo)教師張炳遠(yuǎn)教授關(guān)鍵詞:TRAIL;慢病毒載體;HepG2;細(xì)胞凋亡last,thedifferenceofproportionofapoptoticbetweenexperimentalgroupandthecontrolwasstatisticallysignificantItwasshownthedrugofgemcitabineca
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