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文檔簡介
1、為了提高大豆花粉管通道法轉基因效率,研究直接用農桿菌轉化方法的可行性,以秋大豆品種上海本地青為受體材料,用花粉管通道法在三種CaCl2濃度水平下進行質粒pCAMBIA3301 轉化,又以GV3101、LBA4404、EHA105三種農桿菌菌株直接導入花粉管通道為處理進行了遺傳轉化。以質粒為外源基因平均結實率為36.83%,T0代種子平均成活率為60.89%,T1植株噴施除草劑后平均存活率為8.24%。以農桿菌直接轉化平均結實率為15.9
2、2%,T0代種子平均成活率為20.40%,T1植株噴施除草劑后平均存活率為7.79%。對存活的植株提取DNA進行PCR檢測,以質粒為外源基因的處理共獲得20株轉化苗,三種CaCl2濃度水平的轉化效率分別為0.56%、1.64%、1.40%,有兩種水平的轉化效率約為傳統(tǒng)轉化效率的三倍。以農桿菌直接轉化的處理共獲得5株轉化苗,轉化效率分別為0.17%、0.33%、0.29%。對獲得的第T1代種子用除草劑進行選擇處理和對轉化苗進行PCR檢測表
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