1、楊樹具有分布范圍廣、適應性強的特點，它在環(huán)境綠化、水土保持、工業(yè)林木及固氮方面均有突出作用。毛白楊作為中國特有的楊樹樹種，具喜陽特性，分布范圍廣，是一種重要的生態(tài)防護林以及工業(yè)用林。毛白楊易受鹽漬、干旱和氧化等多種不利環(huán)境因素的影響，因而對其抗逆性分子機理進行深入研究具有重要意義。
　　抗壞血酸過氧化物酶（ascorbate peroxidase，APX）是植物體內(nèi)一種重要的抗氧化酶。它通過參與抗壞血酸-谷胱甘肽循環(huán)來及時清除植物

2、體內(nèi)的H2O2，特別是清除葉綠體中的H2O2。APX是包含原卟啉IX的血紅素過氧化物酶，其氨基酸序列中存在酸堿催化域和血紅素結合域，相對分子質量約為35KD。植物APX基因家族包含4個亞家族，分別是胞質型（cAPX）、線粒體型（mAPX）、葉綠體型（chlAPX）和過氧化物酶體型（mbAPX）基因亞家族。APX常以單體存在，有幾種cAPX以同二聚體形式存在。本實驗以741毛白楊為實驗材料，通過農(nóng)桿菌轉化，將已構建好的反義pBI121-A

3、PX-IV重組表達載體導入741毛白楊的基因組中，得到轉反義APX-IV基因植株，同時分析研究該基因在楊樹抗鹽、抗旱以及抗氧化方面的作用。研究結果如下：
　　1.利用反義APX-IV重組表達載體，通過農(nóng)桿菌介導法轉化楊樹，在20 mg/L Kan的選擇壓下篩選出具有Kan抗性的不定芽，再以10 mg/L Kan對其生根進行篩選，最終獲得具有Kan抗性的再生植株。
　　2.提取初步獲得的具有Kan抗性的轉基因植株的總DNA，以

4、ntp-II序列設計引物，經(jīng)PCR反應能擴增出約700bp目的條帶的植株即為陽性植株。PCR結果顯示，共得到了7個轉基因株系。
　　3.正常條件下，與野生型相比，反義表達 APX植株生長周期長、生根數(shù)量少、根長勢較弱。
　　4.鹽處理條件下，從表型上可發(fā)現(xiàn)，轉反義APX-IV基因植株比野生型植株更早的顯示出鹽害癥狀，鹽處理4d后即表現(xiàn)出部分葉片的葉尖變黃、焦枯的現(xiàn)象；測定結果顯示，轉基因植株體內(nèi)APX和GR酶活性升高的幅度均

5、低于野生型植株，APX酶活性也相對較低。轉基因植株體內(nèi)較低的抗氧化酶活性使體內(nèi)積累大量的活性氧，導致其相對電導率、MDA含量以及H2O2積累量升高的幅度增大，同時AsA含量、葉綠素a、b 和總葉綠素含量下降速度更快、降幅更大。
　　5.干旱處理條件下，轉基因毛白楊較早的表現(xiàn)出葉子卷曲起皺、葉片邊緣壞死等受損癥狀；生理生化指標顯示，轉基因毛白楊體內(nèi)MDA積累量明顯高于野生型毛白楊，同時其抗氧化酶活性與抗氧化物質的含量均低于