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文檔簡介
1、目的:探討DNA雙鏈斷裂修復途徑中關鍵蛋白CtIP在人肝癌組織中的表達情況,同時結(jié)合臨床特征分析其在肝癌發(fā)生發(fā)展中的意義。
方法:
1.應用免疫組化親和素-生物素-過氧化物酶復合物(SABC)三步法技術檢測60例肝癌組織及其對應的癌旁組織中CtIP蛋白的表達水平。
2.應用Western-blot蛋白印跡實驗技術檢測上述2種組織的CtIP蛋白的表達水平。
3.應用實時熒光定量PCR(real-ti
2、me PCR)技術檢測上述60例肝癌患者的肝癌組織和相應癌旁組織中CtIP mRNA的表達水平。
4.分析CtIP蛋白表達水平與肝癌臨床特征之間的關系。
結(jié)果:
1.免疫組化實驗顯示CtIP蛋白陽性染色定位于細胞胞核和胞質(zhì),主要位于細胞胞核中,肝癌細胞中染色呈棕黃色粗大的團塊狀或顆粒狀,癌旁組織陽性染色明顯弱于肝癌組織,呈淡棕色。間質(zhì)細胞未見明顯陽性染色。60例肝癌組織中有38例CtIP蛋白表達陽性,陽性率
3、為63.3%;對應的癌旁組織中有15例表達陽性,陽性率為25.0%,兩者間具有顯著性差異(p<0.05)。
2.Western-blot實驗發(fā)現(xiàn)120KDa處有一特異性條帶,肝癌組織中CtIP蛋白表達條帶的深度明顯高于癌旁組織,測定灰度值并定量分析結(jié)果顯示,肝癌組織CtIP蛋白相對表達量高于癌旁組織,兩者間差異有統(tǒng)計學意義(p<0.05),與免疫組織結(jié)果一致。
3.60例肝癌及對應癌旁組織標本中,肝癌組織CtIP蛋白
4、mRNA相對表達量明顯高于癌旁組織,兩者差異有統(tǒng)計學意義(p<0.05)。
4.分析CtIP蛋白的表達與肝癌的臨床特征的關系發(fā)現(xiàn):CtIP蛋白表達水平與患者有無包膜和肝內(nèi)、淋巴結(jié)或遠處轉(zhuǎn)移有關(p﹤0.05),而與性別、腫瘤直徑大小和Edmondson分級無關(p﹥0.05)。
結(jié)論:CtIP蛋白及其mRNA在肝癌組織中的表達水平顯著高于相應癌旁組織,這種表達異??赡芘c人類肝癌的發(fā)生和轉(zhuǎn)移有關,對臨床診斷和治療有一定
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