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文檔簡介
1、目的:采用熒光定量RT-PCR 方法,將不同級別腦膠質瘤標本、正常腦組織標本中hPOT1的表達水平進行比較,并研究其與端粒長度之間的相關性。為進一步探討膠質瘤中端粒長度的調控機制、膠質瘤的發(fā)生機制提供理論基礎;探討其能否作為判斷膠質瘤生物學行為和預后的指標;為今后臨床應用分子生物學手段或基因治療腫瘤提供資料。為更靈敏、更特異的分子腫瘤標志物的臨床應用提供理論依據(jù)。采用流式細胞儀,對3‘疊氮胸苷及棉酚處理后的C6及TJ905腫瘤細胞增殖指
2、數(shù)進行了測定,初步研究了端粒酶抑制劑對膠質瘤的影響。 方法:采集53例腦膠質瘤手術切除標本,8例正常腦組織。通過熒光定量RT-PCR方法檢測標本中hPOT1的表達,使用ACTB基因作為內參照。應用人的端粒序列特異性探針地高辛標記的(CCCTAA)3進行Southem雜交檢測腦膠質瘤細胞的端粒長度。對C6及TJ905細胞進行培養(yǎng)后,以棉酚或端粒酶抑制劑3‘疊氮胸苷(AZT)進行處理,利用流式細胞技術測定其增殖指數(shù)。 結果:
3、采用SPSS 11.0 統(tǒng)計軟件,對測得數(shù)據(jù)作對數(shù)變換后進行方差齊性檢驗并利用 LSD(Least-Significant Difference)最小顯著差法進行統(tǒng)計分析后發(fā)現(xiàn),腫瘤組織標本中hPOT1的表達明顯高于正常組織。Ⅲ/Ⅵ級膠質瘤標本中hPOT1的表達高于Ⅰ/Ⅱ級膠質瘤標本中hPOT1的表達,二者之間有顯著性差異(P<0.05)。Ⅲ/Ⅳ級之間以及Ⅰ/Ⅱ級之間沒有明顯的相關關系。隨著端粒長度的縮短hPOT1的表達水平升高 (r=
4、-0.963,P<0.05)。經(jīng)3‘疊氮胸苷(AZT)或棉酚處理后,C6及TJ905的增殖指數(shù)均大為降低,同時發(fā)現(xiàn)棉酚很可能是一種新型的端粒酶抑制劑。 結論:POTl表達水平升高在不同級別的膠質瘤中均有體現(xiàn),其升高程度在不同級別膠質瘤中是不同的,反映了腫瘤的增殖潛能不同。POT1表達水平與端粒長度之間有明顯的相關關系,在一定程度上證明hPOT1在調節(jié)端粒長度以及端粒功能的維持方面可能起著重要作用。端粒酶抑制劑有可能作為新的化療藥
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